[发明专利]肺炎支原体IgM抗体胶体金法检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.肺炎支原体IgM抗体胶体金法检测试剂盒，包括硝酸纤维素膜检测线包被的重组抗原MP-Ag、质控线上包被的羊抗鼠IgG抗体和金标垫上包被的由胶体金标记的鼠抗人IgM单抗，其特征在于：

所述重组肺炎支原体抗原为无色透明液体，浓度大于2mg/ml，用SDS-PAGE测定；

所述羊抗鼠IgG抗体为无色透明液体，浓度大于4mg/ml；

所述鼠抗人IgM单抗为无色透明液体，浓度大于2mg/ml，用SDS-PAGE测定，上样量在10μl条件下为两条带。

2.根据权利要求1所述的MP-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）反应膜的制备：用磷酸盐缓冲液将重组MP-Ag稀释到包被浓度为1.0mg/ml，将羊抗鼠IgG抗体稀释成包被浓度为2.0mg/ml，用点膜机将两种包被液分别划到硝酸纤维素膜上，将已包被的硝酸纤维素膜干燥后保存；

（2）鼠抗人IgM单抗金结合物垫的制备：将标记浓度为10-18μg/ml的鼠抗人IgM单抗与胶体金进行偶联制得胶体金标记鼠抗人IgM单抗溶液，以转速为12000r/min离心40min，弃上清，加入胶体金结合物稀释液至原体积的1/2，然后用混合液浸泡金标垫，制备成MP-IgM金结合物垫，将MP-IgM金结合物垫放入干燥保存；

（3）切割装配：在反应膜所在胶板的上部揭去1.5cm宽的不干胶纸，粘贴上粗纤维滤纸，使纸的下部压住反应膜，揭去反应膜下部的0.9cm的不干胶纸，贴上MP-IgM金结合物垫，并且MP-IgM金结合物垫的上部压住反应膜1mm，再揭去MP-IgM金结合物垫下部的的不干胶纸，贴上样品垫，样品垫的上部压住MP-IgM金结合物垫的下部1mm，制成反应板，再用切条机切成4mm试纸条，进行装卡后，装入铝箔袋内制成产品。

3.根据权利要求2所述的肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于所述步骤（1）和（2）的干燥条件为37℃干燥3小时。

4.根据权利要求2所述的肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于所述步骤（2）的鼠抗人IgM单抗的标记浓度为15μg/ml。