[发明专利]果糖基化芒果苷及其制备方法与用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种果糖基化芒果苷及其制备方法与用途，属于生物制药技术领域。 

背景技术

芒果苷是一种四羟基吡酮的碳酮苷，属双苯吡酮类黄酮类化合物，在多种植物中存在，如芒果树、扁桃树、东北龙胆及知母等。芒果苷分子式：C₁₉H₁₈O₁₁，分子量：422.3。芒果苷具有多种生物活性和药理作用，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、抗糖尿、抗炎等(邓家刚，蕈骊兰.长春中医药大学学报，2008，24(4)：463-464.)。 

芒果苷虽具有广泛药理活性，但其溶解度很差，严重限制了其制剂的开发，为方便应用，需要改善芒果苷溶解性和生物利用度。邓家刚等(邓家刚，袁叶.华西药学杂志，2008，23(1)：17-18.)将芒果苷3-酚羟基转化成酚钠盐，芒果苷单钠盐质量收率为92.8％。芒果苷转化成钠盐后，改善了水溶性，有利于其在胃肠道的吸收，进而改善其生物利用度和疗效；实验表明芒果苷及其钠盐均有止咳、化痰和抗炎作用，由于芒果苷单钠盐因其水溶性较好，其作用优于芒果苷，故芒果苷单钠盐有望开发成呼吸系统药物。Hu等(Hu H G，Wang M J，Zhao Q J.Chin Chem Lett，2007，18：1323-1326.)以芒果苷为原料，经烷基化得到一系列3，6，7-O-三取代芒果苷衍生物，其结构均经核磁共振氢谱确证，其中化合物2～11为新化合物；初步的体外抗糖尿病活性筛选结果表明，在相同浓度下，化合物5和11对蛋白酪氨酸磷酸酯酶(PTP1B)的抑制率比芒果苷高出1倍。 

对于复杂结构的天然活性成分来说，利用化学合成来进行结构修饰存在着得率低、反应专一性差、副产物多等缺点，特别是有些反应目前利用化学手段较难实现，生物转化技术却可弥补化学合成的不足。Cantagrel等(欧洲专利申请号：FR20050002223 20050304；公开号：FR 2882762(A1))以来源于两株肠膜状明串珠菌的葡萄糖基转移酶，对芒果苷进行糖基化修 饰，在芒果苷为糖基受体，蔗糖为糖基供体时，得到葡萄糖基-β-(1，6)-芒果苷(CASRN：908570-23-0)。当Leuconostoc mesenteroides NRRL B-1299菌株作为生物催化剂，在0.4g/L芒果苷，40g/L蔗糖条件下，糖基化反应收率为25％；当Leuconostoc mesenteroides NRRL 521-F菌株作为生物催化剂，在0.4g/L芒果苷，40g/L蔗糖条件下，糖基化反应收率为28％。 

芒果苷糖苷化后，水溶性得到显著提高，但糖苷化修饰后分子结构的变化是否影响芒果苷的药理活性，目前还未见相关研究报道。由于芒果苷较差的水溶性，利用生物转化方法进行芒果苷糖基化修饰时，转化前芒果苷浓度普遍较低(均不超过0.5g/L)，产物摩尔转化率也较低(均不超过30％)，这些局限性给获得足够产物进行肿瘤相关疾病的药理实验及后期的工业化生产都带来了相当的难度。 

发明内容

因此，本发明的目的针对目前芒果苷糖基化反应转化前浓度普遍较低，产物摩尔转化率也较低，无法获得足够的产物进行肿瘤相关疾病治疗的不足，提供一种果糖基化芒果苷，其用于治疗肿瘤疾病，能够达到较好的治疗效果。 

本发明的另一目的的提供上述果糖基化芒果苷的制备方法。 

本发明的再一目的是提供上述果糖基化芒果苷在制备用于治疗肿瘤相关疾病的药物中的应用。 

针对上述目的，本发明的技术方案如下： 

一方面，本发明提供一种果糖基化芒果苷，所述果糖基化芒果苷具有下述式(I)所示的结构： 

其中，R₁、R₂、R₃和R₄分别选自氢、甲基、乙基、甲酰基、乙酰基、甲氨基和硫酸基中的一种；R为果糖单糖基或2个果糖连接的寡糖基，其结构如式(II)所示： 

其中，n＝0-1。 

另一方面，本发明提供一种果糖基化芒果苷的制备方法，该方法包括将具有果糖基化酶活力的物质加入含有芒果苷的转化液中，进行生物转化反应，使芒果苷转化为果糖基化芒果苷，所述转化液中含有芒果苷和糖基供体，优选地，所述糖基供体为果糖或蔗糖。 

优选地，所述方法还包括转化反应结束后，去除转化液中的菌体细胞或菌体蛋白，再将其用树脂纯化，然后将经树脂纯化得到的果糖基化芒果苷馏分旋转蒸发或冷冻干燥后得到果糖基化芒果苷粉末或晶体。