[发明专利]猫人参提取物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药猫人参提取物，以及该猫人参提取物的制备方法和医药用途。

背景技术

目前，包括肝癌在内的恶性肿瘤作为常见病、多发病，严重危害人类的健康。世界卫生组织(WHO)和美国临床肿瘤学会(ASCO)统计数据表明，1990年全世界肿瘤所致死亡数占总死亡数的12.3％，预计2015年将达到14.6％。据美国国立癌症研究院(National Cancer Institute)数据：1998～2002年恶性肿瘤发病率为469.7/10万，家庭、国家及社会为此付出的代价沉重。在恶性肿瘤的多种治疗方法中，化疗在临床上发挥着重要的作用。目前，从中药、天然药物中开发抗肿瘤药物已经成为抗肿瘤药物研发的重要方向。

中药猫人参为猕猴桃科植物对萼猕猴桃(Actinidia valvata Dunn)的根和老茎，主要分布于浙江、江西、江苏等华东地区，临床用于治疗恶性肿瘤，为华东地区常用抗肿瘤中药。目前，仅见少量关于猫人参化学成分、药理作用方面的研究报道[张亚妮，刘岭，凌昌全.猫人参有效部位对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用及机制探讨.中国中药杂志，2006，36(11)：918-920；陆胤，陈绍瑗，吴平，等.药用植物猫人参有效成分研究(I)-无机元素分析.浙江大学学报，2004，30(2)：185-188；辛海量，吴迎春，徐燕丰，等.对萼猕猴桃根与茎的比较研究.第二军医大学学报，2008，29(3)：298-302]。

目前，未见有葡聚糖凝胶柱色谱技术用于制备总皂苷含量高的猫人参提取物的研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种总皂苷含量高的猫人参提取物，并提出其制备方法和医药用途。

对于中药提取物的制备而言，简便、快速、高效的脱色、除杂、纯化方法至关重要，也是中药提取物制备工艺中的瓶颈问题。本发明人长期从事中药化学、制备工艺以及抗肿瘤中药新药等方面的研究工作，在猫人参提取物的制备过程中，曾尝试采用多种除杂脱色工艺路线，结果表明不仅工艺步骤繁琐，而且效果也不尽理想。最终经反复筛选优化，采用活性炭和活性白土混合脱色剂对粗提物进行除杂脱色，再用葡聚糖凝胶色谱对脱色后产物进行纯化，取得了很好的效果，非常便于生产应用。

本发明猫人参提取物的有效组分主要为三萜皂苷类成分，包括科罗索酸、2α，3β，24-三羟基乌苏烷-12-烯-28-酸、2α，3α，24-三羟基乌苏烷-12-烯-28-酸和2α，3α，19α，24-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸等，总皂苷占提取物的质量百分含量为40％～75％。

本发明提供的猫人参提取物的制备方法，主要包括药材提取、除杂脱色、分离纯化工序，具体说明如下：

(1)药材提取：将干燥、粉碎后的中药猫人参药材，以体积浓度为50％～95％乙醇或甲醇水溶液，用回流或渗漉方法进行提取，提取液合并，回收浓缩至无醇味，得浓缩液；将上述浓缩液放冷，离心，分取沉淀；

本步骤还可选用体积浓度为70％～95％乙醇或甲醇水溶液进行，优选体积浓度为80％乙醇或甲醇水溶液。考虑到可能的有机溶剂残留、生产中的安全因素以及成本因素，乙醇水溶液为首选。

(2)除杂脱色：将步骤(1)制得的沉淀以体积浓度为50％～100％乙醇或甲醇水溶液溶解，加入脱色剂除杂脱色，脱色液浓缩至近干，得除杂脱色后产物。

本步骤溶解沉淀还可选用体积浓度为70％～100％乙醇或甲醇水溶液，优选体积浓度为100％乙醇或甲醇水溶液。

本步骤脱色剂可选用活性碳，或活性白土，或两者的混合物。优选活性炭与活性白土之比为10∶1～1∶20(重量比)的混合脱色剂，最优选活性炭与活性白土之比为1∶10(重量比)的混合脱色剂。

本步骤脱色剂的用量：脱色剂与药材重量比为25％～200％，优选25％～100％，最优选50％。

(3)分离纯化：将(2)中制得的除杂脱色后产物用体积浓度为50％～95％乙醇或甲醇水溶液溶解，上葡聚糖凝胶色谱柱，先用体积浓度为5％～25％乙醇或甲醇水溶液洗脱至近无色，再用体积浓度为70％～100％乙醇或甲醇水溶液洗脱皂苷类成分，收集洗脱液，浓缩，干燥，粉碎，即得猫人参提取物。

本步骤溶解除杂脱色后产物还可选用体积浓度为70％～95％乙醇或甲醇水溶液，优选体积浓度为80％乙醇或甲醇水溶液。