[发明专利]南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂及制备方法和应用无效
申请号: | 201110148678.0 | 申请日: | 2011-06-03 |
公开(公告)号: | CN102230022A | 公开(公告)日: | 2011-11-02 |
发明(设计)人: | 闻伟刚;王建峰;崔俊霞;张吉红;杨文潮 | 申请(专利权)人: | 宁波检验检疫科学技术研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/94 |
代理公司: | 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 | 代理人: | 程晓明 |
地址: | 315012 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芥菜 花叶 病毒 rt lamp 检测 试剂 制备 方法 应用 | ||
1.南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂,包括反应缓冲液,所述反应缓冲液包含三对特异性引物,其特征在于特异性引物序列为:
FIP:5′-ccccgttccattcactaacaactcttttattggtggtatggtcaaggg- 3′
BIP:5′-actggaatcaactgtttaaataccccgtttttagggggagcgaatttcaat- 3′
F3:5′-taatacactcttgagttactatctagg- 3′
B3:5′-taagcgcagtggagttcgat- 3′
Loop1:5′-tgccataagtgcaagggct- 3′
Loop2:5′-tgttacatcgaggaggatgg- 3′。
2.权利要求1所述的南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂的制备方法,其特征在于包括下述步骤:
(1)选择南芥菜花叶病毒CP编码基因的保守片段为靶目标,该保守片段的扩增目标核苷酸序列为:taatacactc ttgagttact atctaggcat tgggggtatt gtcaagggaa aggtgcatgt ttgtagccct tgcacttatg gcatagtcct a agagttgtt agtgaatgga acggggtcac taacaactgg aatcaactgt ttaaataccc cgggtgttac atcgaggagg atgggagctt
(2)应用primer Express 3.0软件,设计合成引物;
(3)经过大量的反应条件优选、对比试验和验证试验,并经过大量实际样品的检测应用评估,得到扩增效率和特异性好的所述引物。
3.权利要求1所述的南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂在制备ArMV的RT-LAMP标准化试剂盒中的应用。
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