[发明专利]南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂及制备方法和应用无效

专利信息
申请号: 201110148678.0 申请日: 2011-06-03
公开(公告)号: CN102230022A 公开(公告)日: 2011-11-02
发明(设计)人: 闻伟刚;王建峰;崔俊霞;张吉红;杨文潮 申请(专利权)人: 宁波检验检疫科学技术研究院
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/94
代理公司: 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 代理人: 程晓明
地址: 315012 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 芥菜 花叶 病毒 rt lamp 检测 试剂 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂,包括反应缓冲液,所述反应缓冲液包含三对特异性引物,其特征在于特异性引物序列为:

FIP:5′-ccccgttccattcactaacaactcttttattggtggtatggtcaaggg- 3′

BIP:5′-actggaatcaactgtttaaataccccgtttttagggggagcgaatttcaat- 3′

F3:5′-taatacactcttgagttactatctagg- 3′

B3:5′-taagcgcagtggagttcgat- 3′

Loop1:5′-tgccataagtgcaagggct- 3′

Loop2:5′-tgttacatcgaggaggatgg- 3′。

2.权利要求1所述的南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂的制备方法,其特征在于包括下述步骤:

(1)选择南芥菜花叶病毒CP编码基因的保守片段为靶目标,该保守片段的扩增目标核苷酸序列为:taatacactc ttgagttact atctaggcat tgggggtatt gtcaagggaa aggtgcatgt ttgtagccct tgcacttatg gcatagtcct  a agagttgtt agtgaatgga acggggtcac taacaactgg aatcaactgt ttaaataccc cgggtgttac atcgaggagg atgggagctt 

(2)应用primer Express 3.0软件,设计合成引物;

(3)经过大量的反应条件优选、对比试验和验证试验,并经过大量实际样品的检测应用评估,得到扩增效率和特异性好的所述引物。

3.权利要求1所述的南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂在制备ArMV的RT-LAMP标准化试剂盒中的应用。

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