[发明专利]适用于作物SSR分子标记分析的基因组DNA提取方法有效
| 申请号: | 201110144544.1 | 申请日: | 2011-05-31 |
| 公开(公告)号: | CN102220313A | 公开(公告)日: | 2011-10-19 |
| 发明(设计)人: | 梁俊;李杨瑞;陈忠良;莫磊兴;吴凯朝;范业赓;王天顺;牙禹;廖洁;魏源文;邓智年;莫璋红 | 申请(专利权)人: | 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室;农业部甘蔗品质监督检验测试中心(南宁) |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
| 地址: | 530007 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 适用于 作物 ssr 分子 标记 分析 基因组 dna 提取 方法 | ||
1.一种适用于作物SSR分子标记分析的基因组DNA提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)向叶片中加入DNA提取缓冲液,蛋白酶K和核糖核酸酶,振荡混匀;
2)将上述混合体系置于37℃,30min;68℃,20min;37℃,30min;然后于4℃保存;
3)将步骤2)中得到的混合体系冰浴5-10min;
4)将步骤3)中得到的混合体系离心,得上清。
2.根据权利要求1所述的基因组DNA提取方法,其特征在于,步骤1)具体为:向0.02~0.04cm2的叶片中加入50~100μL DNA提取缓冲液,0.2~0.4μL的100mg/mL蛋白酶K和1~2μL的10mg/mL核糖核酸酶,振荡混匀10~20sec;
其中,DNA提取缓冲液的成份为10mmol/L Tris-HCl,1mmol/LEDTA,0.1%SDS,pH值8.0。
3.根据权利要求2所述的基因组DNA提取方法,其特征在于,步骤1)具体为:向0.02~0.04cm2的叶片中加入50μL DNA提取缓冲液,0.2μL的100mg/mL蛋白酶K和1μL的10mg/mL核糖核酸酶,振荡混匀10sec。
4.根据权利要求1所述的基因组DNA提取方法,其特征在于,步骤2)为混合体系置于PCR扩增仪中进行反应。
5.根据权利要求1所述的基因组DNA提取方法,其特征在于,步骤4)为4℃下3000~5000rpm离心10~15min。
6.根据权利要求5所述的基因组DNA提取方法,其特征在于,步骤4)为4℃下3000rpm离心10min。
7.根据权利要求1-6任一项所述的基因组DNA提取方法,其特征在于,所述作物为甘蔗、水稻、玉米、大豆或花生。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室;农业部甘蔗品质监督检验测试中心(南宁),未经广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室;农业部甘蔗品质监督检验测试中心(南宁)许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
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