[发明专利]石榴中没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B的分析方法及应用

权利要求书

1.石榴中没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B的分析方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）准确称取没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B标准品适量，依次用HPLC级水、NaOH溶液和甲醇溶解，混匀，配制成标准储备溶液，避光-18 ℃保存；临用时，用HPLC级水、NaOH溶液和甲醇稀释上述标准储备溶液，配置成不同浓度的没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B标准工作液，避光-18 ℃保存；

（2）用HPLC级水、磷酸和乙腈来配制流动相A和B；

（3）开启高效液相色谱系统，设定高效液相色谱分析条件；

（4）由稀至浓依次将不同浓度的没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B标准工作液用上述高效液相色谱分析条件来检测，记录HPLC色谱图和峰面积，确定没食子酸、鞣花酸、安石榴甙A和安石榴甙B的检测波长、保留时间、检出限、定量限、线性关系和相关系数、方法回收率和稳定性，建立4种多酚化合物的线性方程；

（5）将经过预处理的石榴样品溶液，用0.2 μm微孔滤膜过滤即得供试石榴样品溶液；

用上述高效液相色谱分析条件来检测，记录HPLC色谱图和峰面积，根据4种多酚化合物的线性方程，计算即获得不同石榴样品中没食子酸、鞣花酸、安石榴甙A和安石榴甙B的含量。

2.根据权利要求1所述得石榴中没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B的分析方法，其特征在于其中所述的步骤中（1）中安石榴甙A&B中含有51.54%安石榴甙A和48.46%安石榴甙B； NaOH溶液的浓度为0.06 mol/L；标准储备溶液的浓度：没食子酸为299.40mg/L，鞣花酸为570.00 mg/L，安石榴甙A&B为1905.36 mg/L。

3.根据权利要求1所述得石榴中没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B的分析方法，其特征在于其中所述的步骤中（3）中高效液相色谱分析条件为：规格为100 mm×4.6 mm的Kinetex 2.6 μm C18色谱柱，KrudKatcher Ultra在线过滤预柱，进样量10 μL，流速1.8 mL/min，柱温30 ℃，PDA检测波长200~600 nm；流动相组合为：流动相A：体积比0.1%磷酸水溶液，流动相B：体积比0.1%磷酸乙腈溶液；梯度洗脱条件为：1%B等梯度洗脱0~1.5 min，1%~4.5%B递增线性洗脱1.5~3.0 min，4.5%B等梯度洗脱3.0~5.0 min，4.5%~7.0%B递增线性洗脱5.0~6.5 min，7.0%B等梯度洗脱6.5~8.5 min，7.0%~25.0%B递增线性洗脱8.5~13.73 min，25.0%~90.0%B递增线性洗脱13.73~14.39 min，90.0%~1.0%B递减线性洗脱14.40~16.39 min；采用Masslynx软件来控制整个HPLC系统和收集试验数据，用Masslynx软件的QuanLynx功能来处理试验数据。

4.权利要求1中石榴中没食子酸、鞣花酸和安石榴甙A&B的分析方法的应用：可用于包括石榴提取物、石榴汁或石榴饮料等多种石榴产品中4种多酚化合物——没食子酸、鞣花酸、安石榴甙A和安石榴甙B的分析检测。