[发明专利]生产高纯度头孢菌素C的基因工程菌及其应用无效
| 申请号： | 201110031628.4 | 申请日： | 2011-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN102174420A | 公开（公告）日： | 2011-09-07 |
| 发明（设计）人： | 刘钢;安洋 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/62;C12N15/63;C12P35/06;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生产 纯度 头孢菌素 基因工程 及其 应用 | ||
1.顶头孢霉cefF基因工程菌(Acremonium chrysogenum)，其保藏号为CGMCC No.4515。
2.一种基因工程菌，为将如下融合基因导入宿主菌得到的基因工程菌：序列表中序列1中第7-1194位核苷酸所示DNA片段与蛋白cefF的编码基因构成的融合基因。
3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于：
所述蛋白cefF的编码基因的核苷酸序列如序列表中序列1中第1203-2275位核苷酸所示；
所述宿主菌为顶头孢霉菌(Acremonium chrysogenum)；
所述融合基因是通过重组表达载体导入宿主菌的。
4.根据权利要求2或3所述的基因工程菌，其特征在于：
所述重组表达载体为将所述融合基因插入表达载体pAg1-H3的多克隆位点得到的重组表达载体；
所述融合基因的核苷酸序列为序列表中序列1所示。
5.权利要求1所述的顶头孢霉cefF基因工程菌或权利要求2-4中任一所述的基因工程菌在生产头孢菌素C中的应用。
6.含有如下融合基因的重组质粒：序列表中序列1中第7-1194位核苷酸所示DNA片段与蛋白cefF的编码基因构成的融合基因。
7.根据权利要求6中所述的重组质粒，其特征在于：
所述重组质粒为将所述融合基因插入表达载体pAg1-H3的多克隆位点得到的重组表达载体；
所述蛋白cefF的编码基因的核苷酸序列如序列表中序列1中第1203-2275位核苷酸所示；
所述融合基因的核苷酸序列为序列表中序列1所示。
8.蛋白cefF或蛋白cefF的编码基因在用发酵菌制备头孢菌素C的过程中降低产物中去乙酰氧头孢菌素C的产量中的应用。
9.根据权利要求8中所述的应用，其特征在于：所述蛋白cefF的编码基因的核苷酸序列如序列表中序列1中第1203-2275位核苷酸所示。
10.一种制备头孢菌素C的方法，包括如下步骤：发酵权利要求1所述的顶头孢霉cefF基因工程菌或权利要求2-4中任一所述工程菌，得到头孢菌素C。
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