[发明专利]人血清淀粉样蛋白A3抗体及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及人血清淀粉样蛋白A3抗体及其应用，更详细而言，涉及人血清淀粉样蛋白A3抗体、上述抗体的制造方法、利用上述抗体检测和测定人血清淀粉样蛋白A3的方法、癌治疗方法、癌诊断方法等。

背景技术

已知血清淀粉样蛋白A(SAA)是因继发性淀粉样变性而在组织中沉积的淀粉样蛋白A蛋白在血中的前体。

在小鼠、兔、马等中，已知该SAA具有SAA1、SAA2、SAA3和SAA4这4种同型。

这些SAA中，SAA1和SAA2是与白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)等炎性细胞因子应答的急性时相反应物质，SAA4是高比重脂蛋白(HDL)的构成蛋白。

另一方面，已知SAA3被Toll样受体4(TLR4)识别，介由核因子κB(NFκB)活化免疫应答信号，结果促进了癌的转移；并且确认到，若对皮下移植了癌细胞的荷瘤小鼠给予抗SAA3抗体，则该一系列的信号转导通路(S100A8-SAA3-TLR4)被截断，抑制了癌的转移。TLR4识别作为自然免疫体系的受体的脂多糖(LPS)等毒素，负责感染的防御。这暗示了由本来负责感染防御的自然免疫体系所形成的炎症样的环境促进了癌细胞的迁移(非专利文献1)。如此，暗示了在小鼠中SAA3与癌的转移有关。

另外，由与小鼠等的SAA3的氨基酸序列的同源性等推测，人的SAA3由序列号1表示的氨基酸序列构成(专利文献1)。但是，现实中仅以mRNA水平确认了人SAA3的存在，实际上并没有确认到人生物体内的蛋白表达。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特表2006-516194号公报

非专利文献

非专利文献1：Sachie Hiratsuka，Akira Watanabe，Yoshiko Sakurai，Sachiko Akashi-Takamura，Sachie Ishibashi，Kensuke Miyake，Masabumi Shibuya，Shizuo Akira，Hiroyuki Aburatani and Yoshiro Maru.Nature Cell Bioll 101349-1355(2008).

发明内容

发明要解决的课题

因此，本发明的课题在于制作尚未确认在人生物体内存在的人SAA3的抗体，解明在人生物体内存在人SAA3，同时解明人SAA3与疾病的关系，提供该疾病的治疗方法。

用于解决课题的方案

基于上述见解，本发明人试图根据常规方法在大肠杆菌中表达人SAA3的重组蛋白，以此作为抗原来制作抗体，并从人样本中检测人SAA3，从而解明人SAA3的存在。但是，人SAA3的重组蛋白的表达量极少，没能以此作为抗原进行免疫。并且，本发明人根据抗体制作的常规方法，在将由人SAA3的特征性氨基酸序列(序列号1表示的人SAA3的氨基酸序列的第49～60位)构成的肽与生物体高分子的结合物为抗原的情况下，即使免疫几个月，抗体效价也几乎不上升，无法得到令人满意的抗体。

于是本发明人发现，通过将包含比人SAA3的特征性氨基酸序列稍长的人SAA3的部分氨基酸序列的肽与生物体高分子的结合物作为抗原，所免疫的动物的抗体产生能力提高，从而首次得到了针对人SAA3的抗体。

并且使用该人SAA3抗体对健康者和癌症患者的样本进行了蛋白质印迹，结果仅在癌症患者的样品中检测到与人SAA3抗体的反应物。另外，上述反应物在凝胶上的位置跟上述人SAA3的重组蛋白与人SAA3抗体的反应物的位置相同，因此可知在人生物体内存在人SAA3。

由此发现，在人生物体内确实存在人SAA3，能够用针对人SAA3的抗体对其进行检测，并且人SAA3与癌有关，基于该发现完成了本发明。

即，本发明如下所述。

(1)一种针对人血清淀粉样蛋白A3的人血清淀粉样蛋白A3抗体。

(2)一种人血清淀粉样蛋白A3抗体的制造方法，其特征在于，作为部分氨基酸序列，使包含序列号1表示的人血清淀粉样蛋白A3的氨基酸序列的第48～60位的肽与生物体高分子化合物结合，用该结合物使动物免疫，从该动物采集抗体。

(3)一种人血清淀粉样蛋白A3的检测和测定方法，其特征在于，使人血清淀粉样蛋白A3抗体作用于人样本，检测和测定人样本中的人血清淀粉样蛋白A3。

(4)一种癌诊断方法，其特征在于，使人血清淀粉样蛋白A3抗体作用于人样本，检测和测定人样本中的人血清淀粉样蛋白A3。