[发明专利]一种花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及添加剂领域，尤其是一种花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法。

背景技术

黑莓是欧美地区广泛栽培的四大小果类果树的重要种类之一，1993年世界粮农组织(FAO)将其推荐为世界上第三代水果。黑莓果实柔软多汁、酸甜爽口、色泽艳丽、风味醇美，并且富含营养成分，如：花色苷、维生素C、维生素E、微量元素、氨基酸等，经常食用有延年益寿、轻身驻颜的神奇功效，在国外被称为“生命之果”，近年来，黑莓在我国的种植范围逐年扩大，国内外市场供不应求。

据测定，黑莓果中花色苷含量高达180mg/100g，花色苷为多酚类成分，具有预防血栓、抗癌、抗氧化、抗真菌、抗突变、延缓衰老等重要的生理活性，可作为天然色素、天然抗氧化剂以及营养补充剂加以应用。

目前已有报道黑莓中含有矢车菊-3-葡萄糖苷和矢车菊-3-芸香糖苷两种花色苷成分，通常采用传统的固-液柱色谱分离技术分离得到黑莓中花色苷单体成分。采用固-液柱色谱分离技术分离黑莓中花色苷单体成分时，常把硅胶作为固定相填充在色谱柱内，样品在被流动相洗脱的过程中会因吸附在固定相上而不能完全被洗脱，从而造成色谱柱对产品有死吸附的缺陷；同时，色谱柱对流动相溶剂的要求较高，需要色谱纯级别，成本较高。另一方面，现有的处于实验室研究水平的液-液逆流色谱分离技术所采用的溶剂体系由甲基叔丁基醚、乙腈、正丁酸、三氟乙酸和水五种溶剂组成，其中乙腈和三氟乙酸的价格高、毒性大，溶剂难以循环再利用，不利于花色苷的大量制备，因此有待于开发一种能克服现有技术缺陷的花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法，所述制备方法以黑莓为原料，将其打浆、浸提浓缩、除杂（糖、酸等成分）、纯化，得到花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷。本发明的制备方法成本低、回收率高、进样量大，且操作简便。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法，包括如下步骤：

A、原料预处理：将经过挑选、清洗的黑莓果打浆，得到黑莓果浆；

B、粗提：配制1%盐酸乙醇（v/v）溶液，按料液比为1：10的比例，将配好的盐酸乙醇溶液加入到黑莓果浆中，常温浸提、过滤三次，然后合并滤液并将滤液用旋转蒸发器在40～50℃真空蒸发，浓缩滤液至膏状，得到黑莓浸膏，并回收乙醇；

C、装柱：将经乙醇处理的大孔吸附树脂装入树脂柱中，再用去离子水冲洗；

D、除杂：将黑莓浸膏用少量去离子水溶解得到黑莓上柱液，并注入树脂柱中，然后用去离子水洗涤树脂，再用60%的乙醇将花色苷成分从树脂上解吸下来，将所得到的解吸液用旋转蒸发器在40～50℃真空蒸发，得到花色苷粗品，同时回收乙醇；

E、纯化：按正丁醇∶有机酸∶水的体积比为100∶1～10∶100的比例制备色谱纯化溶剂体系，用高速逆流色谱仪将花色苷粗品进行纯化，得到花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷。

所述的花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法，步骤C中所述大孔吸附树脂为AB-8型大孔吸附树脂。

所述的花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法，步骤E中所述的溶剂体系为正丁醇∶有机酸∶水=100∶1∶100。

所述的花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法，步骤E中所述的有机酸为甲酸。 

所述的花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法，步骤E中所述有机酸为乙酸。

本发明与现有技术相比有如下优点：

1、本发明的花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法采用高速逆流色谱纯化矢车菊-3-葡萄糖苷，其溶剂体系由正丁醇、有机酸（甲酸/乙酸）和水组成，因涉及的原料成本低、毒性小从而降低了成本，提高了上相（正丁醇）的循环使用率及仪器的操作弹性和连续性，减少了有毒有害成分在产品中的残留，安全性高，质量可控。

2、本发明的花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法所采用的分离手段及高速逆流色谱（HSCCC）纯化技术纯化花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷工艺，拓宽了高速逆流色谱两相溶剂体系中有机酸（甲酸/乙酸）的种类和用量。