[发明专利]纤维素酶稳定助剂组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种纤维素酶，具体涉及一种纤维素酶稳定助剂组合物。

背景技术

内切型纤维素酶(Endoglucanase)是纤维素酶系中重要组分，在纤维素水解中起着重要作用，它和纤维二糖水解酶(Cellobihydrolase) 和β-葡萄糖苷酶(β1，4-Glucosidase)一起协同作用将纤维素水解成葡萄糖，因此，内切型纤维素酶在木质纤维生物炼制，食品工业，纺织工业及造纸工业中均有广泛的应用。从我国草菇( Volvariella volvacea) 中克隆到一种新的中性内切型纤维素酶的基因( egI )(Genbank No. AF329732)，与一般的真菌纤维素酶不同，该酶在中性pH环境中具有最高活性和较强的热稳定性，有望成为理想的纺织及造纸工业用纤维素酶。

在酶制剂工业化应用过程中，酶不可避免需要在一定条件进行长时间的运输和储存这样一个流通环节。作为一种生物催化剂，特别是在常温条件下，液体酶的活性在长时间的运输和储存过程中极易受到环境因素变化以及微生物污染的影响。细小的环境因素如温度，压力，pH及离子强度的变化可能引起使用酶蛋白的变性失活，同时对微生物来说，酶液也是一种十分丰富的营养液，在常温条件下极易导致微生物的生长，引起酶蛋白的生物降解失活。因此，如何尽可能地保持酶在运输、储存过程中的稳定性是任何一种酶制剂能否最终在相关领域中获得工业化应用的首要前提。

提高酶的稳定性，目前常用的方法有：（1）自然筛选或蛋白质工程手段获的高稳定性的酶蛋白；（2）化学修饰和固定化处理；（3）添加保护剂。添加保护剂具有方法简单、成本低下和易于操作等多方面原因，是目前工业上提高酶稳定性的最重要手段之一。从目前国内外研究报道看，添加盐类，糖类，多元醇，以及其它无机有机化合物对提高酶的稳定性都有非常理想的效果，但是添加剂的选择取决于酶的自身特性，这些研究还处于起始阶段，距离工业化生产尚有一段距离。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种纤维素酶稳定助剂组合物，以使添加了该添加剂的纤维素酶其具长时间的运输和存储后仍具有较好的酶活力。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种纤维素酶稳定助剂组合物，包括以下各组分：2～4g/100mL增稠剂、0.05～0.15mL/100mL表面活性剂、4～6g/100mL糖类和0.2～0.4g/100mL防腐剂；其中，糖类为葡萄糖、蔗糖或乳糖，表面活性剂为AEO系列的表面活性剂，增稠剂为明胶或山梨醇，防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠或叠氮化钠。

所述的糖类，优选为乳糖。

所述的增稠剂，优选为明胶。

所述的表面活性剂，优选为AEO₄。

所述的防腐剂，优选为叠氮化钠。

所述的纤维素酶稳定助剂组合物，优选包括以下各组分：4g/100mL明胶、0.1mL/100mL AEO₄、4g/100mL乳糖和0.4g/100mL叠氮化钠。

制备上述的纤维素酶稳定助剂组合物的方法，按各组份的添加浓度取各组分，充分混合制得纤维素酶稳定助剂组合物。

上述的纤维素酶稳定助剂组合物在用于增强重组中性纤维素酶稳定性中的应用。

有益效果：本发明的纤维素酶稳定助剂组合物，组分简单，制备方便，在重组中性纤维素酶稳定性中应用，25℃下储存60d后，最高可使纤维素酶活保留率由47.5 %提高到95 %，且能较好的抑制微生物的生长。

附图说明

图1是具体实施方式中各实施例具体参数和试验结果表。

图2是纤维素酶液的SDS-PAGE电泳图。其中，1泳道为原始纤维素酶液，2泳道为25℃，添加添加剂保存60天后的纤维素酶液。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步的解释。

以下实施例所使用的材料如下：

重组中性内切型纤维素酶由工程菌P.pastoris菌株S115MEG1Mut⁺高密度发酵获得，在4℃条件下，5000r/min离心10min后，-80 ℃条件下保存备用。CMC-Na，美国Sigma公司；其他所用试剂均为国产分析纯试剂。

实施例1~9

一种纤维素酶稳定助剂组合物，包括以下各组分：明胶、AEO₄、乳糖和叠氮化钠；按各组份的添加浓度取各组分，充分混合制得纤维素酶稳定助剂组合物。