[发明专利]一种快速分析烟草花冠中花青素苷的方法

权利要求书

1.一种快速分析烟草中花青素苷的方法，其特征是包括对烟草花冠提取液进行高效液相色谱法分离和采用质谱法鉴定花青素苷分子结构。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是所述高效液相色谱法分离过程中的色谱条件是：采用十八烷基键合硅胶作为填充剂；洗脱流动相为甲酸、水、乙腈和甲醇的混合溶液；洗脱流动相采用梯度洗脱分离烟草花冠提取液。

3.如权利要求2所述的方法，其特征是流动相梯度洗脱时的柱温为25-35℃；洗脱流速为0.8-1mL/min；检测波长为520-530nm。

4.如权利要求2或3所述的方法，其特征是所述的洗脱流动相为由体积之比为1∶9-2∶8的甲酸和水的混合液组成的A液和由体积之比为85∶15-80∶20的乙腈-甲醇的混合液组成的B液组成。

5.如权利要求4所述的方法，其特征是所述流动相的洗脱梯度依次为：

0min，90％A液与10％B液；

10min，80％A液与20％B液；

12min，50％A液与50％B液；

15min，90％A液与10％B液。

6.如权利要求4所述的方法，其特征是所述流动相的洗脱梯度依次为：

0min，90％A液与10％B液；

20min，70％A液与30％B液；

25min，90％A液与10％B液。

7.如权利要求2或3所述的方法，其特征是所述的洗脱流动相为由体积之比为0.1∶9-10∶89.9-90.9的三氟乙酸、甲酸和水的混合液组成的A液和由体积之比为85∶15-80∶20的乙腈-甲醇的混合液组成的B液组成。

8.如权利要求7所述的方法，其特征是所述流动相的洗脱梯度依次为：

0min，90％A液与10％B液；

20min；70％A液与30％B液；

25min，90％A液与10％B液。

9.如权利要求1-8任一所述方法，其特征是所述烟草花冠提取液按照如下步骤制备而成：

1)采集烟草的盛开期的新鲜花冠，收集花冠着色部分样品；

2)将着色的花冠样品用液氮冷冻，研磨成粉末后加入到提取液中，避光，进行花青素苷的提取，其中，每1克花冠样品提取过程中加入的提取液的量为3-6mL；提取时间为20-72h；

3)吸取上层清液，得到所述花青素苷提取液。

10.如权利要求9所述的方法，其特征是步骤2)中所述的提取液为浓盐酸与甲醇混合液，浓盐酸与甲醇的体积之比为1∶99-999，其中浓盐酸的质量百分比浓度为36.5-37％。