[发明专利]IL-23在肝癌早期病变诊断中的应用

说明书

发明领域

本发明涉及肝癌早期病变诊断的新标记物和方法，还涉及用于肝癌早期病变诊断的试剂盒。

发明背景

原发性肝癌是我国发生率最高的恶性肿瘤之一，每年因患肝癌而死亡的人数约占全世界肝癌死亡人数的50％，严重威胁着人民群众的生命健康，给患者家庭及国家造成了沉重的经济负担。在我国，肝癌发生的主要病因是慢性持续性乙型肝炎病毒的感染，表现为血清乙型肝炎病毒表面抗原持续阳性，这部分人群是肝癌发生的危险人群。根据2006年全国流行病学调查结果显示，我国自然人群中乙型肝炎病毒表面抗原调整后阳性率高达7.18％，估计有乙肝病毒表面抗原携带者9400万人。目前，对于临床诊断的肝癌的治疗手段单一受限，患者的死亡率居多种恶性肿瘤的首位。因此，预防慢性持续乙肝病毒感染者进展为肝癌，及早发现肝癌的早期病变，进而采取积极的诊疗措施，可极大提高肝癌患者的生存率。

根据《中国抗癌协会肝癌专业委员会》于2001年9月在广州所制定的“原发性肝癌的临床诊断与分期标准”，(中华肝脏病杂志，2001年12月第9卷第6期第324页)，我国目前最常用的原发性肝癌早期诊断方法是在高危人群中定期进行血清中甲胎蛋白的检测以及影像学的筛查(高危人群：40岁及以上男性，45岁及以上女性的慢性乙肝病毒感染者)。诊断标准为至少具有以下特征之一：(a)AFP≥400μg/L，能排除妊娠、生殖系胚胎源性肿瘤、活动性肝病及转移性肝癌，并能触及肿大、坚硬及有大结节状肿块的肝脏或影像学检查有肝癌特征的占位性病变者；(b)AFP＜400μg/L，能排除妊娠、生殖系胚胎源性肿瘤、活动性肝病及转移性肝癌，并有两种影像学检查有肝癌特征的占位性病变或有两种肝癌标志物(DCP、GGT II、AFU及CA19-9等)阳性及一种影像学检查有肝癌特征的占位性病变者。(c)有肝癌的临床表现并有肯定的肝外转移病灶(包括肉眼可见的血性腹水或在其中发现癌细胞)并能排除转移性肝癌者。而这一诊断的做出往往在肝癌发生之后，病人已经丧失了最佳的治疗时机。此外，流行病学调查显示，在慢性乙肝病毒表面抗原携带者中，每年有1％的人群自然进展为肝癌，终身肝癌的发生率累计约有40％。因此在高危人群中及早发现早期的病变特征，从而采取积极的手段与措施进行干预和治疗，提高患者的生活质量与生存率。需要建立高效便捷易行的方法。

由慢性乙肝进展为肝癌是一个漫长的过程，可长达40-50年，是机体与病毒长期相互作用的结果。因此，临床医生通常针对40岁及以上男性，45岁及以上女性的慢性乙肝病毒感染者这一高危群体，定期检测其血清中甲胎蛋白的水平并附加超声影像学的筛查，以期采用现行的常规手段发现早期肝癌患者。近年来研究发现，在慢性乙肝病毒感染的患者中，病毒感染的肝细胞和识别感染肝细胞的免疫细胞分泌多种不同的细胞因子，在由慢性乙肝病毒感染状态进展为肝癌的病程进展中发挥着重要作用。

白细胞介素23(IL-23)是一个异二聚体造血细胞因子，由p40和p19两个亚基组成，主要由机体活化的巨噬细胞和树突状细胞产生，可促进T细胞的增殖和IFN-γ的产生。IL-23优先刺激机体记忆性T细胞而不是初始型T细胞群。其受体广泛表达于活化T细胞、记忆性T细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞，IL-23作用于这些细胞，诱导IFN-γ等前炎性细胞因子的产生，在炎症性疾病、自身免疫性疾病的发病以及抗肿瘤和抗感染等方面发挥重要作用。

发明概述

在一个方面，本发明提供了一种鉴定慢性乙型肝炎病毒感染对象例如人具有发生肝癌倾向的方法，包括：

检测得自所述对象的生物学样品中IL-23的水平，其中检测样品中IL-23水平升高是所述对象具有发生肝癌倾向的指征。

在一个实施方案中，所述生物学样品是血液样品如血清或其衍生物。

在一个实施方案中，所述样品中IL-23的水平通过检测IL-23蛋白或IL-23的mRNA的水平来确定。

在一个实施方案中，使用IL-23特异性抗体或其抗原结合片段检测所述生物学样品中IL-23蛋白的水平。

在一个实施方案中，所述检测样品中IL-23水平升高是检测样品中IL-23水平与对照样品中IL-23水平相比是升高的。

在一个实施方案中，所述检测样品中IL-23水平升高是检测样品中IL-23蛋白水平高于截断值。在一个实施方案中，对象具有发生肝癌倾向的截断值为855pg/ml。

在一个实施方案中，所述检测样品中IL-23蛋白的水平通过检测p19亚基或其同源物来确定。