[发明专利]盐酸苯达莫司汀及其有关物质的高效液相色谱分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物盐酸苯达莫司汀及其有关物质的检测方法，特别是用高效液相色谱法进行分析的方法。

背景技术

在药物分析中，有关物质(related substances)检测是控制药品质量的重要指标。

药物分析中所称的“有关物质”是指特定药物中不是主要组成物，但与成份相关的物质。一种药品从合成原料药到制备有关的制剂，再经贮藏、运输、使用，要经历一段较为复杂和漫长的过程。在此期间，每一过程都有可能产生有关的物质，如生产中可能带入起始原料、试剂、中间体、副产物和异构体等；在贮藏和运输过程中，可能产生降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。为保证药物的安全有效，同时也要考虑到生产实际情况，因此可允许含有一定限量的无害或低毒性的有关物质，但对毒性较大，能危害人体健康的、无效的或能影响药物稳定性的有关物质则必须严格控制。

盐酸苯达莫司汀(1-甲基-5-双(2-氯乙基)氨基-2-苯并咪唑丁酸盐酸盐)是一种氮芥类抗肿瘤药物。该药物2007年才在欧洲上市，尚未被欧洲药典和美国药典所收载。对于其有关物质和含量的测定方法，不但没有具体的标准，而且国内外文献也未见有详细报道，各国专利数据库中也无相关信息。

盐酸苯达莫司汀原料药物中常见的主要有关物质有八种(见表1)，为保证药品的质量，需要进行分离并测定其含量。

因此，研究并建立盐酸苯达莫司汀有关物质的分析方法，非常必要。

表1盐酸苯达莫司汀及其有关物质的结构式和化学名称

发明内容

本发明的目的是提供一种盐酸苯达莫司汀有关物质高效液相色谱分析方法。通过探索盐酸苯达莫司汀有关物质高效液相色谱分析的各种条件，达到快速、简便、可靠、有效进行分析的目的。

发明人通过对高效液相色谱分析中色谱柱、流动相等条件反复筛选，摸索出了合适的分析条件。为兼顾成品中8种杂质分离的需要，选择了合适的缓冲溶液体系及流动相的比例等关键检测条件，最终确立的方法达到了上述发明目的。

本发明的技术方案如下：

一种盐酸苯达莫司汀中有关物质的高效液相色谱分析方法，将待测样品用流动相配制成0.2mg/ml～1.5mg/ml的样品溶液，在十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱上进行反相等度洗脱，流动相为有机溶剂和缓冲溶液；所述有机溶剂是甲醇或乙腈，所述缓冲溶液是用酸调节pH至2.0～4.0的盐水溶液；所述盐选自六氟磷酸盐、十二烷基硫酸盐、磷酸盐、醋酸盐或甲酸盐，浓度为0.01～0.05mol/L。

所述酸选自磷酸、醋酸、甲酸或三氟乙酸。所述盐优选六氟磷酸盐钾或十二烷基硫酸钠；

有机溶剂在流动相中的体积比优选为40％～45％。

可采用以下检测条件：

样品检测波长：220～245nm；流动相洗脱速率：0.8～1.2ml/min；色谱柱温度：15～35℃；进样量：20μl。

本方法的效果和优点是：

1、可有效分离出盐酸苯达莫司汀原料药中的杂质，方法有效、可靠；

2、能对盐酸苯达莫司汀原料药中的杂质进行定量，可严格控制盐酸苯达莫司汀质量；

3、分析时间周期短，在40分钟内，能将八个已知杂质与主峰基线分离；

4、操作简单。

附图说明：

图1：本发明方法系统专属性实验色谱图(图中各峰均由保留时间标注，主峰为盐酸苯达莫司汀，其中用文字特别标明的是盐酸苯达莫司汀中可能出现的各个已知杂质峰)；

图2～图10、图12是用本发明方法测定盐酸苯达莫司汀有关物质所得到的高效液相色谱图，图中标记为检测得到的杂质E和未知杂质1～4，检测基础条件为：柱温25℃；进样浓度1.0mg/ml；流速：1.0ml/min；检测波长233nm；

图3～图10是在此基础上调整相应参数后测得的图谱，其中：

图3：流动相流速为0.8ml/min；

图4：流动相流速为1.2ml/min；

图5：色谱柱柱温为15℃；

图6：色谱柱柱温为35℃；

图7：流动相比例A∶B(V∶V)＝45∶55；

图8：流动相比例A∶B(V∶V)＝40∶60；图9：缓冲溶液pH值为2.0；

图10：缓冲溶液pH值为4.0；