[发明专利]白细胞介素3衍生片段的融合蛋白及其用途有效
申请号: | 201010234598.2 | 申请日: | 2010-07-23 |
公开(公告)号: | CN102336835A | 公开(公告)日: | 2012-02-01 |
发明(设计)人: | 卢圣栋;肖卫纯;王湛;卢丽;陈伟京;李涛;王欣;路金芝 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院基础医学研究所 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12P21/02;A61K48/00;A61K47/48;A61P35/02;A61K47/42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白细胞 衍生 片段 融合 蛋白 及其 用途 | ||
1.一种包含突变改型的白细胞介素3衍生片段的融合蛋白,其选自:1)IL2mIL3m2SON3,2)IL2mIL3m3SON3或3)IL2mIL3m1SON3,其中IL2m是IL2的突变改型的衍生片段,其相应的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示,其中IL3m2是IL3的突变改型的衍生片段2,其氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示,IL3m3是IL3的突变改型的衍生片段3,其相应的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示,IL3m1是IL3的突变改型的衍生片段1,其相应的氨基酸序列如SEQ ID NO.12,其中SON3是DNA结合蛋白SON的衍生片段且富含碱性氨基酸,其相应的氨基酸序列如SEQID NO.13所示。
2.根据权利要求1所述的包含突变改型的白细胞介素3衍生片段的融合蛋白作为非病毒载体的用途,该用途是指所述融合蛋白利用其自身碱性氨基酸所带的正电荷与携带负电荷的核苷酸序列相互结合并利用融合蛋白中与细胞表面特异性受体结合的成分将所述核苷酸序列转运至特定的靶细胞,从而起到靶向性运输工具的作用。
3.根据权利要求1所述的包含突变改型的白细胞介素3衍生片段的融合蛋白的编码核苷酸序列,其特征在于编码所述IL2m、IL3m2、SON3的核苷酸序列在不改变所述融合蛋白氨基酸序列的情况下,根据使用的宿主细胞的密码子偏爱性相应调整所述核苷酸序列的密码子,优选地,IL3m2的DNA编码序列如SEQ ID NO.2所示,IL3m3的DNA编码序列如SEQ ID NO.3所示,IL3m1的DNA编码序列如SEQID NO.4所示,IL2m的DNA编码序列如SEQ ID NO.1所示,SON3的DNA编码序列如SEQ ID NO.5所示。
4.根据权利要求1所述的包含突变改型的白细胞介素3衍生片段的融合蛋白,其特征在于IL2mIL3m2SON3的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示,和/或IL2mIL3m3SON3的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示,和/或IL2mIL3m1SON3的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示,优选地,IL2mIL3m2SON3的DNA编码序列如SEQID NO.6所示,和/或IL2mIL3m3SON3的DNA编码序列如SEQ ID NO.7所示,和/或IL2mIL3m1SON3的DNA编码序列如SEQ ID NO.8所示。
5.将根据权利要求1或4所述的包含突变改型的白细胞介素3衍生片段的融合蛋白的编码核苷酸序列或根据权利要求3所述的编码核苷酸序列重组连接到原核或真核表达载体后获得的表达重组体,优选地,所述表达重组体是由原核质粒载体pCW111构建而成的表达型重组体pCW-IL2mIL3m2SON3、pCW-IL2mIL3m3SON3或pCW-IL2mIL3m1SON3。
6.包含根据权利要求1或4所述的包含突变改型的白细胞介素3衍生片段的融合蛋白的编码核苷酸序列或根据权利要求3所述的编码核苷酸序列或根据权利要求5所述的表达重组体的工程细胞或工程菌,其中所述细胞为适用于表达重组体表达的植物细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞,所述菌为适用于表达重组体表达的细菌、放线菌、霉菌或酵母菌,优选地,所述菌为细菌,更优选地,所述菌为大肠杆菌,最优选地,所述菌为大肠杆菌DH5α。
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