[发明专利]对四环素一族具有特异性识别能力的分子印迹聚合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种对四环素一族具有特异性识别能力的分子印迹聚合物的制备方法，属于新材料领域。

背景技术

四环素类药物是由链霉菌产生或经半合成制取的一类碱性广谱抗生素，可用于防止禽畜病害，促进幼年禽畜生长，因此作为兽药被广泛的应用。但是，不合理地使用该类药物，如用药剂量过大、用药时间过长、滥用药物及不遵守休药期提前屠宰等，导致该类药物及其代谢产物残留于动物的肌肉、蛋、奶、脏器组织中。人类长期摄入含四环素类抗生素残留的食品后，药物不断在体内蓄积，当浓度达到一定量后，就会对人体产生毒性作用，主要表现为对胃、肠、肝脏的损害及牙齿的染色等，还会造成过敏反应，二重感染，致畸胎作用，对人类的健康构成潜在的危害。因此，世界食品法典委员会对禽肉中四环素类抗生素残留有严格的限量要求，国际贸易中对其限量也有严格规定。因此，开展食品中四环素类抗生素的残留检测具有十分重要的现实意义。

然而，传统的检测方法主要依靠固相萃取技术，但是传统固相萃取吸附剂与目标物之间的作用力是非特异性的，通常需对萃取和洗脱条件进行仔细选择，因而对不同基质的分离与分析需要选择不同的柱填料，从而限制了固相萃取技术的进一步发展。为了提高柱效与重现性、扩大其应用领域，亟待开发研制出新型高选择性识别能力填料基质。分子印迹聚合物以其对模板分子特异性的吸附，已成为当前样品前处理中浓缩和净化的首选。吴平谷等以盐酸四环素为模板分子制备了一种四环素分子印迹聚合物并制备了一种特异性吸附四环素固相萃取柱(专利申请号：200710070753)。张大兵等同样以盐酸四环素为模板分子制备了一种四环素分子印迹聚合物用于水样品中四环素的直接进化处理(专利申请号：200810202645)。然而这些分子印迹聚合物只具有一种模板分子，且只对四环素这种单一物质具有特异性的吸附能力。在实际检测工作中，食品中含有多种四环素类抗生素的残留，涉及土霉素、四环素、去甲金霉素、金霉素、强力霉素、4-差向土霉素、4-差向四环素、4-差向金霉素、二甲胺四环素和甲烯土霉素等10种兽药的残留检测。仅特异性识别四环素的分子印迹聚合物难以满足实际工作的需要，亟待开发研制出一种对四环素一族均有特异性识别能力的的分子印迹聚合物，实现对10种四环素类抗生素的特异性识别。

发明内容

本发明的目的在于弥补上述现有技术的不足，提供一种对四环素一族具有特异性识别能力的分子印迹聚合物的制备方法，该方法采用双模板分子，操作简单，制备出的分子印迹聚合物对10种四环素类抗生素具有特异性的吸附，能够快速、灵敏、准确、高效地将样品中的四环素类抗生素残留物进行富集净化。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种对四环素一族具有特异性识别能力的分子印迹聚合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)以摩尔比为5∶5～9∶1的金霉素和土霉素为模板分子，以四乙烯吡啶或甲基丙烯酸为功能单体，N，N’-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂，偶氮二异丁腈为引发剂，将模板分子、功能单体、交联剂和引发剂溶于乙腈中，使模板分子在乙腈中的浓度为0.1～1mol/L，模板分子与功能单体的摩尔比为1∶1～1∶10，功能单体∶交联剂∶引发剂的摩尔比为1∶1～10∶0.01～0.1，得到混合液；

(2)将混合液密封后，于45～60℃搅拌条件下充分反应，生成印迹聚合物；

(3)以乙酸的甲醇溶液为提取液，对印迹聚合物进行提取以去除模板分子，再用甲醇或乙腈提取去除乙酸分子，最后将印迹聚合物置于真空干燥箱中干燥至衡重，得到对四环素一族具有特异性识别能力的分子印迹聚合物。

步骤(1)中所述功能单体为甲基丙烯酸。

步骤(2)中是将混合液超声脱气5～10min，再通氮气5～10min除去氧分子后密封。

步骤(3)中所述乙酸的甲醇溶液中，乙酸的体积百分比浓度为10～30％，最佳为10％；所述提取方法为索氏提取。

上述方法的最佳制备条件为：将金霉素、土霉素、甲基丙烯酸、N，N’-亚甲基双丙烯酰胺和偶氮二异丁腈溶于乙腈中，使金霉素和土霉素在乙腈中的总浓度为1mol/L，金霉素、土霉素、甲基丙烯酸、N，N’-亚甲基双丙烯酰胺和偶氮二异丁腈的摩尔比为1mmol∶1mmol∶8mmol∶40mmol∶0.08mmol，得到混合液；将混合液密封后，于50℃搅拌条件下反应18小时。