[发明专利]汉城链霉素及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种汉城链霉菌，其特征是：在PDA平板上，菌落典型特征为基内菌丝黄色，易产生单个菌落，划线不连续气生菌丝灰褐色，孢子白色；在马丁培养基上，基内菌丝灰褐色，气生菌丝白色，孢子灰褐色，菌落产生花状边缘；在高氏一号平板上，基内菌丝灰褐色，气生菌丝白色，孢子灰褐色，菌落产生花状边缘；在查氏培养基上状态较特殊，基内菌丝浅黄色，气生菌丝亮黄绿色，孢子褐色。经中国科学院微生物研究所鉴定为汉城链霉菌Streptomyces seoulensis，现保藏在中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为CGMCC No.3689，保藏日期为2010年3月25日。

2.根据权利要求1所述汉城链霉菌发酵液制备的汉城链霉素，其特征是结构式为：

3.根据权利要求2所述的汉城链霉素streptoseomycin的制备方法，其特征是由以下步骤构成：

1)将新鲜的从对虾Penaeus chinensis肠道中分离、纯化得到的汉城链霉菌Streptomycesseoulensis菌丝体块接种到高氏I号培养基中，于摇床上，在150rpm、28℃条件下培养5天作为种子液；高氏I号培养基：可溶性淀粉20g，KNO₃ 1g，NaCl 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，FeSO₄·7H₂O 0.01g，1L蒸馏水；

2)然后将种子液接种于高氏或马丁培养基中，在150rpm、20-30℃条件下发酵8天；

3)将步骤2所得发酵液经纱布过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，真空浓缩干燥得黑色粗浸膏F1；

4)将粗浸膏F1悬浮于水，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，所得乙酸乙酯萃取液经浓缩得浸膏F2；

5)对浸膏F2进行硅胶柱层析，依次用先4倍体积的氯仿，氯仿∶甲醇＝100∶1，氯仿∶甲醇＝100∶2，氯仿∶甲醇＝100∶4，进行洗脱，浓缩100∶4段得到黑色浸膏F3；

6)然后对浸膏F3进行Sephadex LH-20分离，洗脱液氯仿∶甲醇体积比1∶1，合并绿色荧光部分洗脱液得淡黄色浸膏F4；

7)对浸膏F4，用反相柱ODS进行分离，先用55％甲醇进行洗脱除去环二肽，然后用65％甲醇洗脱，合并绿色荧光部分洗脱液得淡黄色固体F5；

8)对浸膏F5，用高压液相色谱法制备得到汉城链霉素streptoseomycin。

4.根据权利要求2所述的汉城链霉素streptoseomycin在制备抗生素药物中的应用。