[发明专利]双向一步PCR基因分型的新方法

权利要求书

1.一种双向一步PCR基因分型的新方法，其特征在于步骤如下：

a)根据SNP位点的基因型设计5’末端模板不匹配或5’末端封闭的特异性PCR引物；

b)采用5’末端模板不匹配或5’末端封闭的特异性PCR引物，从SNP位点同时分别向两个方向进行PCR；

c)SNP位点远端的外端引物用来控制PCR产物的长度；

d)根据两个方向的PCR产物长度的不同和DNA序列的不同，对两方向的PCR产物加以检测，从而得到SNP的结果。

2.根据权利要求1所述的双向一步PCR基因分型的新方法，其特征在于：所述的5’末端模板不匹配的特异性PCR引物为一系列引物，它们的3’末端分别与不同的基因型相匹配。

3.根据权利要求1所述的双向一步PCR基因分型的新方法，其特征在于：所述的5’末端模板不匹配的特异性PCR引物的5’末端不被核酸外切酶所降解。

4.根据权利要求1所述的双向一步PCR基因分型的新方法，其特征在于：所述的PCR为一系列PCR，每一PCR由一个SNP位点的特异性PCR引物和一个SNP位点远端的外端引物来完成，或任何一对相对引物完成。

5.根据权利要求1所述的双向一步PCR基因分型的新方法，其特征在于：所述的外端引物为PCR引物，其5’-3’指向为由SNP位点远端指向SNP位点。

6.根据权利要求1所述的双向一步PCR基因分型的新方法，其特征在于：所述的步骤d)中，根据两个方向的PCR产物长度的不同和DNA序列的不同，对两方向的PCR产物加以检测，是指用电泳及荧光探针定性或定量检测。