[发明专利]反式西红花酸的制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种制备西红花酸的方法，是从天然植物中提取转化得到反式西红花酸，该反式西红花酸具有治疗脂肪肝的显著功效。 

背景技术

西红花酸是西红花苷的苷元，是从一种鸢尾科番红花属植物-西红花中分离提取出的一种有效成分之一。它具有多不饱和共轭烯酸结构，属类胡萝卜素物质。西红花酸在栀子和西红花等天然植物中含量较高；栀子、西红花等天然植物中除了含有西红花酸外还含有大量的西红花苷，即西红花酸和糖的复合物，如西红花苷1、2、3、4。在一定的条件下水解西红花苷的糖苷键，脱去糖配体就可生成西红花酸。 

研究发现，西红花酸具有抗氧化、保护心脑血管、提高免疫功能和抗肿瘤等多种生理活性，在抗心血管系统疾病、抗动脉粥样硬化、防治糖尿病并发症等方面有明确的生物活性。西红花酸具有抗肿瘤活性，可以有效地抑制癌细胞的增殖，在胰腺癌、肺癌、胶质细胞瘤、乳腺癌的相关实验中都有证明。已有研究证明西红花酸对于肝脏脂质代谢有重要的调节作用，可以有效改善肥胖大鼠的胰岛素抵抗情况。其对于黄曲霉素B1以及各种急性的肝中毒损伤也具有一定的保护作 用。 

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一种无过量饮酒史，病变主体在肝小叶，以肝细胞弥漫性脂肪变性和脂肪贮积为主的临床病理综合征。NAFLD所指的脂肪肝一系列的病变状态，依照其严重程度可分为脂肪肝、脂肪性肝炎(Non-alcoholicsteatohepatitis，NASH)、肝硬化。其中，NASH伴随有较明显的肝脂肪变性，肝纤维化等病理特征。据统计NAFLD在北美地区的患病率高达20％-30％，在亚洲，患病率约有12％～24％，且这一数字也在呈不断的上升趋势。 

由于人们生活状态的改变，过营养现象变得越来越普遍。日渐减少的体力活动加上生活中无处不在的高脂肪含量食物，肥胖、2型糖尿病、代谢综合征已经成为了NAFLD常见的并发症。目前普遍认为NAFLD是代谢综合征和胰岛素抵抗的一种肝脏表现。长期的NAFLD一旦经过恶化，就会由单纯的肝脂肪变性，诱发成为肝炎，肝纤维化，最后导致肝硬化、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)，对人类生命健康造成极大的威胁。关于NAFLD的发病机制研究中，Day所提出的“二次打击学说”已得到学术界普遍认可。所谓2次打击学说，即指第一次打击为肥胖、2型糖尿病、脂代谢紊乱等导致的胰岛素抵抗、游离脂肪酸增加、肝脏脂肪代谢障碍，从而使肝细胞合成甘油三脂(TG)增加而输出减少，导致肝细胞脂肪变性；第二次打击是指在第一次打击的基础上再加重损伤，从而使单纯性脂肪肝发展至非酒精性脂肪性肝炎(NASH)甚至肝纤维化。导致第2次打击可有多种因素，而其 中氧化应激和脂质过氧化起到了重要的作用。 

在探讨西红花酸所起到的各种作用的同时，不容忽视的是它的抗氧化功效。研究发现，西红花酸对于H₂O₂产生的羟自由基(OH·)有很好的清除作用，可有效降低自由基对红细胞和亚细胞膜性结构的破坏作用，同时也能显著抑制自由基对DNA的损伤。 

中国专利申请200710001116.7公开了一种从栀子中提取制备西红花酸的方法，即将栀子粉碎经蒸馏水或乙醇溶液超声强化提取，提取液过滤后浓缩，水提取的浓缩液乙醇沉淀后再浓缩或经大孔树脂分离栀子苷类物质，将西红花苷洗脱液浓缩后酸碱水解，离心得到西红花酸粗品进一步纯化后得高纯度西红花酸；该文件提供了一种西红花酸的批量生产方法。但是，这种方法在提取中均要采用乙醇提取或乙醇沉淀，且超声强化提取的方法受限于设备而不适于大规模生产，且其先提取后浓缩或上大孔树脂后洗脱液浓缩以后再进行酸碱水解的工艺繁琐、存在多次浓缩过程，消耗大量能源不利于环保。 

发明内容

本发明旨在提供一种反式西红花酸的制备方法，在天然植物原料提取过程中将西红花苷转化为西红花酸。 

本发明还提供了上述反式西红花酸在制备治疗脂肪肝的药物方面的应用。 

本发明采用稀碱提取，将提取浓缩和水解过程合而为一，在提取 浓缩过程中将西红花苷进行水解转化成西红花酸。即将原料粉碎，用碱性稀醇溶液进行转化提取，提取液用酸调节至pH7～9，减压浓缩，过滤或离心去除沉淀杂质，清液调节至pH2～5，过滤或离心收集红色沉淀，用弱酸性水或稀乙醇溶液洗涤沉淀，干燥，得西红花酸含量高于50％的西红花酸粗品；西红花酸粗品重结晶纯化后得到含量高于95％的高纯度反式西红花酸，具体方法如下：