[发明专利]一种发酵型烟用葡萄枸杞香料及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于微生物发酵技术的应用，具体地说是一种发酵型烟用葡萄枸杞香料及其制备方法。

技术背景

微生物发酵是生物技术的重要组成部分，它将微生物学、生物化学、化学工程学的基本原理有机的结合起来，是一门利用微生物的生长代谢活动来生产各种有用物质的工程技术。目前，在香精香料的生物合成中应用最广泛的生物技术是微生物发酵工程，以工农业废料为原料，利用微生物可以生产各种天然香料。由微生物发酵法生产的风味化合物主要有四大类：萜烯类、内酯类、吡喃类和酯类。Drawert和BantoS报道从乳酸克鲁维酵母中分离得到单菇类香茅醇、芳樟醇和香叶醇；Lee等应用酵母如Sporidiobolus salmonicolor和Yarrowialipolytica催化蓖麻酸，经β-氧化为有桃香味儿的γ-癸内酯；Demain等应用微生物在其代谢过程中生产香兰素等芳香族类风味化合物；比利时Gent等以杂醇油为前体物，利用姆拉克汉逊酵母将醇转化为相应的乙酸酯，产物被活性炭吸附，解吸后的浓缩物可作为天然香蕉香料。

葡萄属葡萄科植物葡萄的果实。在我国长江流域以北各地均有产，主要产于新疆、甘肃、山西、河北、山东等地。中国专利：(CN101455442)公开了“一种葡萄浸膏及其制备方法和在卷烟加香中的应用”，添加葡萄浸膏的卷烟具有明显降低了烟气对咽喉部所产生的刺激性，能使卷烟烟气细腻、柔和，余味舒适，减少了杂气，增加了香吃味，改善了口感余味，减轻了吸烟的危害。

枸杞(Lycium barbarum L)属于双子叶植物药茄科植物枸杞的成熟果实。我国各地均有产，主产宁夏、河北、山东、江苏、浙江、江西、湖北、四川、云南、福建等省。枸杞浸膏和枸杞净油是卷烟中常用的添加剂，其能降低卷烟刺激性，改善口感。

发明的内容

本发明目的就是针对现有技术的缺陷提供一种发酵型烟用葡萄枸杞香料及其制备方法，它以葡萄和枸杞为原料，通过微生物发酵技术生产具有葡萄酒果香的发酵型烟用香料。

本发明的技术方案是这样实现的：它是将葡萄汁和枸杞提取物按重量配比为99∶1--5∶1混合后加入葡萄糖制得培养基，将保藏号为CCTCC NO：M209272、保藏名称为酿酒酵母HHL-1(Saccharomycescerevisiae HHL-1)的培养物制得培养液，然后将培养基置入培养液中进行发酵制备而成。其中所述的枸杞提取物是将枸杞和水按重量比为1∶5-1∶15回流提取后过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.20±0.02g/cm³。葡萄糖的加入量为葡萄汁和枸杞提取物混合液总量的0.1％-5％。

本发明的制备方法是将葡萄汁和枸杞提取物按重量配比为99∶1--5∶1混合后加入葡萄糖制得培养基，将保藏号为CCTCC NO：M209272、保藏名称为酿酒酵母HHL-1(Saccharomyces cerevisiaeHHL-1)的培养物制得培养液，然后将培养基置入培养液中进行发酵制备而成。

本发明的具体制备方法包括以下步骤：

(1)、将枸杞和水按重量比为1∶5-1∶15回流提取后过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.20±0.02g/cm³的浓缩液；

(2)、将葡萄汁和枸杞提取物按重量配比为99∶1--5∶1混合后加入葡萄糖制得培养基，葡萄糖的加入量为葡萄汁和枸杞提取物混合液总量的0.1％-5％；

(3)、将保藏号为CCTCC NO：M209272、保藏名称为酿酒酵母HHL-1的培养物接种到LB培养基中，使得其菌浓度达到1.5×10¹⁰个/ml，制得产香菌HHL-1培养溶液；

(4)、将步骤(2)制得的培养基置入培养液中进行发酵，将发酵液过滤，收集过滤液。

本发明更好的技术方案是：将发酵液于0.8μm微孔滤膜下过滤，取澄清液，于0.2μm微孔滤膜下过滤，收集过滤液，向过滤液中添加过滤液总重量2％-10％的丙二醇，即得本发明。

其中产香菌HHL-1溶液接种量为0.01-0.5％。发酵工艺为：pH值为2.5-5.5，搅拌转速为200rpm，通气量为1VVM，前发酵温度为15℃-30℃，前发酵时间为1d-7d，后发酵温度为5℃-15℃，后发酵时间为7d-28d。