[发明专利]脂化咪唑并喹啉衍生物

说明书

背景

本发明涉及新的佐剂化合物、它们的制备方法、包含它们的组合物以及它们作为疫苗佐剂的用途。

微生物疫苗的精制和简化以及合成和重组亚基抗原用于提高疫苗的可制造性和安全导致疫苗效能的下降。这引起了对佐剂与抗原共同给药以提高疫苗活性以及合成和重组表位的弱免疫原性的研究。佐剂是增强针对疫苗抗原的体液和/或细胞介导免疫应答的添加物。但是，由于免疫系统功能所涉及分子机制的复杂性质，疫苗佐剂的设计历史上是困难的。虽然长久以来已知添加微生物组分以增强适应性免疫应答，但是最近才表明，免疫监视所涉及细胞(例如上皮细胞和树突细胞)上的Toll样受体(TLR)通过所谓“病原相关模式”或“PAMP”结合许多的这些微生物产品。许多疫苗佐剂和独立的免疫调节剂似乎与TLR家族成员相互作用。

已鉴定的10种已知人TLR中，5种与细菌组分识别有关(TLR1、2、4、5、6)，4种其它的(TLR3、7、8、9)似乎被限制在胞质小室中并与病毒RNA(TLR3、7、8)和去甲基化DNA(TLR9)的检测有关(Iwasaki，A.，Nat Immunol 2004，5，987)。TLR的活化调节胞内信号转导途径，并通过与胞内衔接物分子如MyD88、TRIF、TIRAP和TRAM的相互作用引起基因表达(Akira，S.Nat Rev Immunol 2004，4，499；Takeda，K.Semin Immunol 2004，16，3)。这些衔接物分子可有差别地调节炎症细胞因子/趋化因子和I型干扰素(IFNa/b)(可引起优先增强抗原特异性体液和细胞介导免疫应答)的表达(Zughaier，S.Infect Immun 2005，73，2940)。体液免疫是防御细菌病原体的主线，但是在病毒疾病和癌症情况下，细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的诱导似乎对保护性免疫是决定性的。

目前，一组称为明矾的铝盐是人疫苗所用的主要佐剂。但是明矾通常只增强体液(Th2)免疫，并由于通过其它途径(例如皮下或皮内接种引起肉芽肿)的局部毒性而一般肌内使用(Aguilar，J.Vaccine 2007，25，3752)。明矾的其它潜在副作用包括增加IgE产生、变应原性和神经毒性。因此，需要新的安全有效的疫苗佐剂，其能够刺激抗体和Tb1型免疫应答，并与不同给药途径和抗原制剂兼容。

在TLR7和TLR8活化的情况下，必须识别天然(富含U和/或G)病毒ssRNA配体的几个不同类小分子模拟物。它们包括主要与TLR7相互作用的一些与氧化鸟苷代谢物(氧代鸟苷)相关的抗病毒化合物(Heil，F.Eur J Immunol 2003，33，2987；Hemmi，2002)，以及结合TLR7和/或TLR8的腺嘌呤衍生物。这些化合物的免疫刺激能力归因于TLR/MyD88依赖性信号转导途径和细胞因子(包括IL-6以及I型(尤其干扰素-a)和II型干扰素)的产生。TLR7或TLR8活化引起上调树突细胞(DC)上的共刺激分子(例如CD-40、CD-80、CD-86)以及I类和II类MHC分子。DC是涉及T淋巴细胞吸收和提呈抗原的免疫系统的主要细胞。浆细胞样树突细胞(plasmacytoid dendritic cell，pDC)优先表达TLR7，是专职的干扰素-a生产细胞；而mDC仅表达TLR8。mDC上的TLR8活化引起优先产生促炎细胞因子如IL-12、TNF-a和IFN-g以及细胞介导免疫(CMI)。

已受到相当关注的一类腺嘌呤衍生物是1H-咪唑并[4，5-c]喹啉(IQ)。当以乳膏形式局部施用时，发现该类咪喹莫德(imiquimod)(R847，S-26398)的原型成员有效对抗生殖乳头瘤病毒感染、光化性角化病和基底细胞癌。但是，咪喹莫德具有相当低的干扰素诱导活性，且口服和局部制剂均不无副作用。事实上，在利用咪喹莫德的HCV临床试验中报道了严重的副作用。TLR7激动剂的大部分免疫“足迹”通常已引起对毒性的关注：由于毒性问题最近暂停了利用另一TLR7激动剂ANA-975(氧代鸟苷衍生物)的临床试验。