[发明专利]软骨脱细胞基质及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种软骨脱细胞基质，其特征在于，所述基质的厚度为1-30μm，且通过下述方法制备得到：

(1)将动物软骨切为厚度为1-30μm的薄片；

(2)将步骤(1)得到的薄片进行脱细胞处理；得到软骨脱细胞基质。

2.如权利要求1所述的软骨脱细胞基质，其特征在于，所述基质的形状为人耳廓、鼻背、鼻翼、下颏、颧弓、眉弓、管状、菱形、片状、圆柱等多种形状但不仅限于此。

3.一种如权利要求1或2任一所述的软骨脱细胞基质的制备方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

(1)将动物软骨切为厚度为1-30μm的薄片；和

(2)将步骤(1)得到的薄片进行脱细胞处理，得到如权利要求1或2任一所述的软骨脱细胞基质。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的脱细胞处理是将步骤(1)得到的薄片置于0.5-3％的十二烷基硫酸钠(SDS)溶液中5-48小时。

5.一种组织工程化软骨移植物，其特征在于，它包括种子细胞和如权利要求1或2任一所述的软骨脱细胞基质；

所述的种子细胞选自软骨细胞、骨髓基质干细胞hBMSCs、脂肪间充质干细胞等成体来源间充质干细胞、脐带血干细胞、胚胎干来源间充质细胞、IPS  细胞诱导全能型干细胞、或其混合。

6.如权利要求5所述的移植物，其特征在于，以移植物的总重量计，其中的软骨脱细胞基质占20-40％。

7.一种如权利要求5或6任一所述的组织工程化软骨移植物的制备方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

(a)将种子细胞接种于如权利要求1或2任一所述的软骨脱细胞基质的一个表面上；

(b)在接种有种子细胞的基质表面上覆盖另一片如权利要求1或2任一所述的软骨脱细胞基质；和

(c)重复步骤(a)-(b)直至如权利要求1或2任一所述的软骨脱细胞基质有10-30层，得到如权利要求5或6任一所述的组织工程化软骨移植物；

所述的种子细胞选自软骨细胞、骨髓基质干细胞hBMSCs、脂肪间充质干细胞等成体来源间充质干细胞、脐带血干细胞、胚胎干来源间充质细胞、IPS细胞诱导全能型干细胞、或其混合。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，以每层软骨脱细胞基质的表面积为30-40平方毫米计，每层软骨脱细胞基质表面上接种的种子细胞为0.5-10×10⁵个。

9.如权利要求7或8任一所述的制备方法，其特征在于，在步骤(c)后还包括步骤(d)：将得到的组织工程化软骨移植物体外培养2-6周。

10.一种如权利要求1或2任一所述的软骨脱细胞基质的用途，其特征在于，用于体外构建组织工程化软骨移植物。