[发明专利]重组融合蛋白PTD-MAX及其表达方法与应用无效

专利信息
申请号: 200910192151.0 申请日: 2009-09-08
公开(公告)号: CN101665539A 公开(公告)日: 2010-03-10
发明(设计)人: 陈建苏;余榕捷;丁勇 申请(专利权)人: 暨南大学
主分类号: C07K19/00 分类号: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12P21/02;G01N33/68;A61K38/17;A61K47/48;A61P7/02;A61P9/10;A61P15/08;A61P15/10;A61P25/00;A61P25/04
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 代理人: 陈 卫
地址: 51063*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 重组 融合 蛋白 ptd max 及其 表达 方法 应用
【权利要求书】:

1、一种重组融合蛋白PTD-MAX,其氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。

2、编码权利要求1所述重组融合蛋白PTD-MAX的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

3、根据权利要求2所述基因,其特征在于合成该基因时所用引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~3所示。

4、权利要求1所述重组融合蛋白PTD-MAX的表达方法,其特征在于包括如下步骤:

(1)采用核苷酸序列如SEQ ID NO:1~3所示的引物进两步PCR扩增得到核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的基因;

(2)将上述所得基因经双酶切、克隆构建得到重组质粒;

(3)将上述重组质粒转化大肠杆菌宿主菌,构建表达工程菌;

(4)用诱导剂异丙基-D硫代半乳糖苷诱导表达重组目的蛋白;

(5)表达的目的蛋白经几丁质柱纯化,硫醇诱导蛋白内含肽的N端切割,释放目的多肽C端硫酯,多肽C端硫酯水解得到重组融合蛋白PTD-MAX。

5、根据权利要求4所述表达方法,其特征在于所述步骤(2)中,双酶切是采用NdeI和XhoI双酶切。

6、权利要求1所述重组融合蛋白PTD-MAX在制备诊断、治疗与PAC1受体相关疾病药物中的应用。

7、根据权利要求6所述应用,其特征在于所述与PAC1受体相关疾病为脑损伤、脑缺血、防止神经细胞死亡、抗炎、男性阳痿、性冷淡、不孕不育、神经痛、神经病、神经混乱、焦虑症、记忆损伤、痴呆、认知混乱、中枢神经系统疾病、偏头痛、神经畏缩、血栓症、视网膜病变、视神经萎缩、视神经保护或视神经损伤修复。

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