[发明专利]混合石蜡、PCR反应试剂的保存方法以及反应试剂盒有效
| 申请号： | 200910190112.7 | 申请日： | 2009-09-08 |
| 公开（公告）号： | CN101665816A | 公开（公告）日： | 2010-03-10 |
| 发明（设计）人： | 张鹏;汪再兴;吴炳义;彭论;严琼英 | 申请（专利权）人： | 深圳市生科源技术有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518000广东省深圳市龙岗区清林西*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 混合 石蜡 pcr 反应 试剂 保存 方法 以及 试剂盒 | ||
【说明书】：
技术领域
本发明涉及一种采用混合石蜡对PCR反应试剂进行保存的方法以及含有 该混合石蜡的PCR反应试剂盒。
背景技术
实时荧光定量PCR(Real Time Polymerase Chain Reaction，Real Time PCR 实时PCR)技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测， 从而实现对起始模板定量或定性分析的方法。目前在基础科学研究、临床诊断、 疾病研究及药物研发等领域都有广泛应用。其基本原理为：在PCR反应体系中 引入一种荧光化学物质，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断积累，荧光 信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光信号强度，这样就可 以通过荧光强度变化监测产物量的变化，得到一条荧光扩增曲线图，在曲线指 数扩增阶段，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，可进行定 量分析。但是在一般的PCR试剂盒中(反应液体积一般为10μl～100μl)，由于 反应液体积较少，在高温条件或长途运输过程中，又易因蒸发而体积减少，造 成反应液体积和成分的变化，从而影响检测结果；并且长时间保存后，反应液 中的Taq酶(耐热性多聚酶)、UNG酶(尿嘧啶DNA糖基酶)易失活也影响扩 增效率。
如果能采用一种方法，能保证少量的反应液体积在高温或运输的条件下不 发生体积和成分的变化，并且能长时间的保持Taq酶的活性，这将给PCR试剂 盒的使用带来更大的方便。为解决上述问题，目前有两种方法，一种是使用植 物油作为热启动PCR反应中的蒸汽障碍，以减少溶剂挥发，但这种方法并不能 解决长时间保持Taq酶活性的问题，另一种是采用固体石蜡将PCR反应中的酶 与其他成分隔离，创造了更多的实用和有效的热启动PCR方法，但现有固体 石蜡熔点太高，约为50～70℃，而且在-20℃的条件下，PCR反应试剂只能保存 1～2周。另外，若PCR反应体系中还含有UNG酶，UNG酶适合的作用温度为 37～50℃，现有固体石蜡熔点太高，若要熔化，需要加热到50℃以上，影响了 UNG酶在PCR反应液中发挥防污染的作用，从而可能会影响实验结果。
发明内容
本发明实施例的第一目的在于提供一种利用上述混合石蜡进行PCR反应 试剂的保存方法。
本发明实施例的第二目的在于提供一种含有上述混合石蜡的PCR反应试 剂盒。
本发明实施例的PCR反应试剂的保存方法，PCR反应试剂中含有酶和其它 必要成份，该方法为利用上述混合石蜡将PCR反应试剂中的酶与其他成份隔 离，该混合石蜡由液体石蜡(Liquid Paraffin)和熔化后的固体石蜡 (Paraffin wax)均匀混合而成，其中，固体石蜡选自熔点高于50℃的固体石蜡， 固体石蜡和液体石蜡的比值为1∶4～1∶12(w/v)。
本发明实施例的PCR反应试剂盒，包括反应容器及置于反应容器中的反 应液，所述反应液包括酶和其它必要成份，该PCR反应试剂盒中还包括用于将 反应液中酶和其它成份隔离的混合石蜡，该混合石蜡由液体石蜡(Liquid Paraffin)和熔化后的固体石蜡(Paraffin wax)均匀混合而成，其中，固体石 蜡选自熔点高于50℃的固体石蜡，固体石蜡和液体石蜡的比值为1∶4～1∶12 (w/v)。
与现有技术相比，上述技术方案采用熔点高于50℃的固体石蜡熔化后和液 体石蜡按一定比例混合配制成一种混合石蜡，经过测试(参见具体实施例)， 该混合石蜡熔点在27～38℃之间，用于将PCR反应液中酶和其它成份隔离，熔 点适中，在-20℃的条件下PCR反应试剂可保存半年。若PCR反应体系中还含 有UNG酶，当需要熔化石蜡，使酶和其它成份混合时，无须加热到50℃或以 上，不会影响UNG酶在PCR反应液中发挥防污染作用，从而不会因此而对实 验结果产生影响。此外，本发明实施例的混合石蜡制造方法简单，成本低。
附图说明
图1是本发明实施例提供的PCR反应试剂中加入石蜡后对基因1扩增的 Ct值影响
图2是本发明实施例提供的PCR反应试剂中加入石蜡后对基因2扩增的 Ct值影响
图3是是本发明实施例6混合石蜡的质谱图。
具体实施方式
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳市生科源技术有限公司，未经深圳市生科源技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200910190112.7/2.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种粉蒸肉的制作方法
- 下一篇：一种清咽润喉保健食品
- 同类专利
- 一种基于模板依赖的DNA聚合酶的低成本DNA合成方法-201910607098.X
- 宋理富;元英进;耿枫;齐浩;李炳志 - 天津大学
- 2019-07-06 - 2019-10-22 - C12P19/34
- 本发明涉及一种基于模板依赖的DNA聚合酶的低成本DNA合成方法；包括不完全互补延伸引物的序列设计；不完全互补延伸引物的制备与修饰；不完全互补延伸引物和/或待合成序列基底的固相固定；待合成序列与特定不完全互补延伸引物混合；加入模板依赖的DNA聚合酶、混合单核苷酸溶液与反应缓冲液；10‑55℃温度范围内恒温或变温促进反应，在不完全互补延伸引物指导下,DNA聚合酶将待合成序列延伸固定的1个到5个碱基后停止延伸；将待合成序列与不完全互补延伸引物分离；然后返回下一个碱基加入循环直至序列合成完毕及序列洗脱。本发明实现了短结合序列在待延伸引物末端结合的特异性，大大降低了合成任意序列所需的延伸引物的数量。
- 一种提高体外合成mRNA稳定性的方法-201910443939.8
- 王小莉;李东升 - 湖北爱济莱斯生物科技有限公司
- 2019-05-27 - 2019-09-10 - C12P19/34
- 本发明公开了一种提高体外合成mRNA稳定性的方法，以luciferase mRNA合成模板质粒为模板分别进行PCR加尾、帽子结构类似物修饰、碱基类似物修饰后，再用MEGAscript T7试剂盒按说明书在T7 RNA聚合酶的作用下合成mRNA。本发明通过对polyA尾长短、帽子类似物以及碱基类似物对体外合成mRNA翻译效率和稳定性的研究发现，通过这一系列的修饰可以提高体外合成mRNA在细胞内的翻译效率、延长表达时间。
- 一种CpG ODNs的合成方法与应用-201610240333.0
- 李军涛;赵金红 - 李军涛
- 2016-04-18 - 2019-08-09 - C12P19/34
- 本发明公开了一种CpG ODNs的合成方法与应用。本发明通过化学方法全序列合成得到形串联重复CpG序列的线性序列，接着用磷酸激酶或连接酶将线性序列连接成环形，得到环形模板；采用引物酶对环形模板等温扩增，得到CpG ODNs。本发明提供的合成方法不使用引物和内切酶，能一次性合成毫克级别的CpG ODNs，能用于规模化药用原料制备。
- 在乳液微滴中结合多重置换扩增和PCR-201780059828.6
- A·R·阿巴特;D·苏科维奇 - 加利福尼亚大学董事会
- 2017-08-09 - 2019-08-02 - C12P19/34
- 本文所述的方法和系统提供了改进的基于乳液液滴的核酸扩增方法，其允许基于核酸扩增技术(例如PCR)检测的序列以检测、定量和/或分选包含在生物系统中的核酸。核酸可以是自由漂浮的或包含于活体或非活体结构，包括颗粒、病毒和细胞。核酸可包括例如DNA或RNA。
- 冷休克蛋白质组合物和用于其用途的方法以及试剂盒-201410799429.1
- 井上正顺;S·费德塔里;加藤郁之进;L·朱;向井博之;上森隆司;西胁一惠 - 新泽西内科与牙科大学
- 2009-03-02 - 2019-04-23 - C12P19/34
- 本发明提供了包含用于改进的DNA合成反应(具有改进的反应性)的冷休克蛋白质的组合物，使用这些组合物用于合成DNA的方法，在这些方法中使用的试剂盒，以及通过这些方法产生的DNA组合物。本发明进一步提供用于鉴定内切核糖核酸酶切割位点的包含冷休克蛋白质的组合物，使用这些组合物用于鉴定内切核糖核酸酶切割位点的方法，以及在这些方法中使用的试剂盒。
- 一种构筑集束状DNA纳米结构的方法-201811621769.X
- 何丹农;杨栋磊;王萍;徐艳;朱元杰;周如鑫;金彩虹 - 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
- 2018-12-28 - 2019-04-19 - C12P19/34
- 本发明涉及一种构筑集束状DNA纳米结构的方法，以四条DNA单链构筑无限生长的DNA纳米结构，这里的四条DNA单链只要在配对上符合我们的设计，就可以随机生成。可以只使用四条链构成的一个单元构筑无限结构，也可以通过特定的单元数控制整体集束的长度。本发明集束型结构是由多个螺旋紧密排列而成，在医药领域有潜在应用。该DNA纳米结构易于修饰，具备良好的生物相容性。本发明中的制备方法简单，结构稳定。该单元既可组装得到无限生长的结构，也可以组装得到可控长度固定宽度的结构。
- L-核酸的酶促合成-201811516622.4
- A·佩什;R·大卫;F·雅罗什;M·雅恩兹;S·克鲁斯曼 - 诺松制药股份公司
- 2013-05-16 - 2019-04-02 - C12P19/34
- 本发明涉及一种用于添加一个或多个L‑核苷酸到第一L‑核酸的3'端的方法，其中所述方法包括在包含酶活性展现部分的蛋白质存在下使所述一个或多个L‑核苷酸与所述第一L‑核酸反应的步骤，其中所述酶活性能够添加一个或多个L‑核苷酸到所述第一L‑核酸的3'端。
- 用于修饰核酸的试剂盒-201510404762.2
- 杰罗马·箭之撒;加力·大鹿;海缨·李·格鲁内瓦德;猊克拉士·铠如酋 - 阿霹震中科技公司
- 2009-10-24 - 2019-03-12 - C12P19/34
- 本发明提供了用于产生靶DNA的加标签的DNA片段文库的试剂盒，其包含多个转座体复合物，其中至少一个第一转座体复合物包含高活性Tn5转座酶和包含Tn5型转座子末端序列和第一标签序列的至少一个第一多核苷酸，以及第二转座体复合物包含高活性Tn5转座酶和包含Tn5型转座子末端序列和第二标签序列的至少一个第二多核苷酸，和b)具有链置换活性的DNA聚合酶，缺乏3'到5'外切核酸酶活性的DNA聚合酶和具有3'到5'外切核酸酶活性的DNA聚合酶的掺混物，具有5'到3'外切核酸酶活性的DNA聚合酶组合物，同时缺乏链置换活性与缺乏5'到3'外切核酸酶活性的连接酶和DNA聚合酶，或连接酶和连接寡核苷酸中的至少之一。该试剂盒可用于产生5'和3'加标签的DNA片段以用于多种过程。
- 核酸合成方法-201811448177.2
- 邢伟;梁金金;吕伟莹 - 深圳华大生命科学研究院
- 2018-11-30 - 2019-03-01 - C12P19/34
- 本发明涉及核酸合成领域。具体地，本发明涉及使用浸泡式反应方案进行核酸合成的方法，所述浸泡式反应方案包括使其上固定有起始核酸分子的固体支持物依次浸泡在含有反应试剂、终止试剂、切除试剂、洗涤试剂的不同的反应容器中以实现核酸合成。
- 一种制备聚肌胞的方法-201811483478.9
- 王义伟;郑其升;许梦微;侯继波 - 江苏省农业科学院
- 2018-12-06 - 2019-02-19 - C12P19/34
- 本发明提供一种制备聚肌胞的方法，涉及生物技术领域，具体涉及一种制备聚肌胞的方法。该制备聚肌胞的方法，包括如下步骤：（1）分别合成聚肌苷酸Poly I和聚胞苷酸尿苷酸Poly CnU，所述Poly CnU中每n个连续的胞苷酸后插入了1个尿苷酸；（2）将聚胞苷酸尿苷酸Poly CnU和聚肌苷酸Poly I退火形成错配的双链核糖核酸Poly I:CnU；（3）将双链核糖核酸Poly I:CnU采用S1核酸酶进行酶切，得到片段大小为n bp的聚肌胞。本发明制备聚肌胞的方法，操作简单，可获得长度一致的聚肌胞。
- 无细胞生成核糖核酸-201780033464.4
- W.J.布莱克;D.S.康宁汉姆;D.麦凯克伦;J.R.阿布希尔;M.古普塔 - 绿光生物科技股份有限公司
- 2017-04-06 - 2019-01-11 - C12P19/34
- 本文中在一些方面提供了用于核糖核酸的无细胞生产的方法和组合物。
- 用于使用耐热的错配内切核酸酶的方法-201480026443.6
- 松村清之;高津成彰;上森隆司;向井博之 - 宝生物工程株式会社
- 2014-03-13 - 2018-12-04 - C12P19/34
- 提供了使用新颖耐热的错配核酸酶的错配特异性切割反应，用于使用错配核酸酶去除核酸扩增反应中的误差的方法，用于抑制核酸扩增反应过程中扩增具有特定碱基序列的核酸的方法，和用于使用该抑制方法检测具有单碱基多态突变的核酸的方法。
- 一种具有核酸内切酶活性的RecJ蛋白及在基因编辑中的应用-201810708639.3
- 郑明刚;王玲;徐孟欣;王闻 - 国家海洋局第一海洋研究所;青岛大学
- 2018-07-02 - 2018-11-23 - C12P19/34
- 本发明的目的是提供一种RecJ蛋白在基因编辑中的应用，使用RecJ蛋白进行双链DNA的切割；从而能够对基因组DNA进行切割。本发明使用从海洋嗜碱菌克隆到的RecJ基因剪切超螺旋质粒成开环和线性化，直至将所作用的质粒彻底降解；该BaRecJ能够对表达宿主基因组同时进行多个位点的剪切，影响宿主的分裂；该酶能够消除宿主内携带该基因的质粒和宿主内的其他质粒。
- 构建光响应DNA纳米结构的方法-201810616114.7
- 寇波;印珏;沈午枫;任少康;王袁杰;周浩南 - 南京工程学院
- 2018-06-15 - 2018-11-13 - C12P19/34
- 本发明提供了一种构建光响应DNA纳米结构的方法，包括下述步骤：步骤一，以缩水甘油为原料采用三步合成制备甘油连接偶氮苯的亚磷酰胺保护单体；步骤二，以亚磷酰胺保护单体为原料，通过DNA合成仪将偶氮苯插入到设计DNA序列中的指定位置，得到光敏DNA链；步骤三，将光敏DNA链与其他设计序列一起加入缓冲溶液体系，放入PCR仪(或保温杯)中进行退火，得到光响应DNA纳米结构；步骤四，通过原子力显微镜等手段观察DNA自组装纳米结构，在紫外光照射下，纳米结构完全或部分散开，在可见光照射下，纳米结构恢复。此方法可以方便的制备出光响应DNA纳米结构，实现了洁净、高效的光控纳米结构变化。
- 用于核酸扩增的核酸-201380026175.3
- P·麦德波谷;D·考芬博格;K·肖恩顿 - 贝克顿·迪金森公司
- 2013-03-13 - 2018-10-30 - C12P19/34
- 本文提供可用于核酸扩增例如定量核酸扩增的核酸序列。
- 用于合成错误最小化核酸分子的材料和方法-201380009031.7
- D·吉布森;N·卡亚扎;T·理查德松 - 合成基因组股份有限公司
- 2013-02-01 - 2018-10-30 - C12P19/34
- 本发明提供了可用于对核酸分子进行纠错的材料和方法。通过暴露于具有单向错配内切核酸酶活性的分子来使具有核苷酸错配的第一多个双链核酸分子片段化，留下在所述分子的末端或近末端具有错配的双链核酸分子。然后将所述核酸分子暴露于具有单向外切核酸酶活性的分子以去除所述错配核苷酸。然后通过例如具有DNA聚合酶活性的分子的作用填充所述缺失的核苷酸。结果是双链核酸分子的核苷酸错配频率降低。本发明还提供了编码错配内切核酸酶的新颖核酸序列、由此编码的多肽以及核酸构建体、转基因细胞及其各种组合物。
- 用于自RNA模板开始的等温DNA扩增试剂盒-201380044858.1
- J.R.尼尔森;R.S.杜蒂;G.A.格罗斯曼;R.C.赫勒 - 通用电气公司
- 2013-06-27 - 2018-10-19 - C12P19/34
- 提供了扩增RNA模板的方法。所述方法包括使用第一反应混合物，将核糖核酸(RNA)模板逆转录以形成cDNA，所述第一反应混合物包含RNA模板、能够与RNA模板杂交的至少一种引物、逆转录酶和脱氧核苷三磷酸(dNTPs)；和使用第二反应混合物，扩增cDNA以形成扩增产物，所述第二反应混合物包含至少一种链置换DNA聚合酶、至少一种含肌苷的引物和能够在引物的肌苷残基的DNA 3'产生缺口的核酸酶。所述方法在等温条件下完成，无需使cDNA模板变性。也提供了定量测定样品中的RNA模板的方法和检测样品中的RNA模板的方法。也提供了用于自核糖核酸(RNA)模板扩增脱氧核酸(DNA)的试剂盒。
- 一种5`端磷酸化单链DNA的制备方法及其应用-201710067173.9
- 樊春海;王丽华;李江;诸兵 - 中国科学院上海应用物理研究所
- 2017-02-06 - 2018-08-14 - C12P19/34
- 本发明公开了一种5'端磷酸化单链DNA的制备方法及其应用。该制备方法包括如下步骤：(1)在目的DNA两端插入限制性内切酶的酶切位点序列，形成茎环结构前体；(2)将步骤(1)获得的茎环结构前体溶解于缓冲液中并进行退火处理，获得茎环结构溶液；(3)将步骤(2)获得的茎环结构溶液加入限制性内切酶处理，处理后使限制性内切酶失活，得酶切产物；(4)将步骤(3)所得酶切产物回收，即得。本发明制备方法步骤简单、成本低廉，磷酸化效率高，所得5'端磷酸化单链DNA易于表征和纯化，将其应用于基因编辑、靶向定位和/或调控可以显著提高效率，具有广阔的应用前景。
- 在液相中的连接测定-201680018676.0
- 安东尼·史蒂文斯;布鲁斯·塞利希曼;乔安妮·M·耶克利;乔尔·麦库姆 - 生物蜘蛛技术有限公司
- 2016-01-26 - 2018-06-01 - C12P19/34
- 用于检测核酸序列的在液相中的连接测定。
- 混合物样品的精确分子去卷积-201680046872.9
- S·塞尔瓦拉;N·海兹曼;C·E·莱恩 - 阿瑞玛基因组学公司
- 2016-07-04 - 2018-04-17 - C12P19/34
- 本公开内容涉及将来自不同起源或来源的遗传物质的混合物样品去卷积的方法。所公开的方法可以用于各种应用，包括在母本血浆或其它体液中来自无细胞核酸的胎儿基因组、胎儿‑组(例如外显子组)或其它靶向胎儿基因座的非侵入性确定；在含有来自正常细胞和肿瘤细胞的核酸混合物的体液样品中来自无细胞核酸的癌症相关突变的确定；和使用来自移植受体的体液定量供体细胞污染，以监测和/或预测移植过程的结果。
- 极端PCR-201380039367.8
- C.T.维特威尔;J.S.法拉 - 犹他州大学研究基金会
- 2013-05-23 - 2018-02-23 - C12P19/34
- 提供具有改进的效率和产量的用于在<20秒钟循环内进行PCR的方法、装置和试剂盒。
- 重组酶聚合酶扩增试剂盒、扩增方法及扩增试剂-201610587482.4
- 盛司潼;龚敬文 - 广州康昕瑞基因健康科技有限公司
- 2016-07-22 - 2018-01-30 - C12P19/34
- 本发明涉及一种重组酶聚合酶扩增试剂盒，包括Ecoli RecA蛋白；λ phage Orf蛋白；Ecoli SSB蛋白及DNA聚合酶；本发明还提供了一种重组酶聚合酶扩增方法及扩增试剂。本发明的重组酶聚合酶扩增试剂盒，采用Ecoli RecA蛋白、Ecoli SSB蛋白及λ phage Orf蛋白协同作用的扩增体系，扩展了重组酶聚合酶扩增的应用范围；与传统PCR技术相比，本发明的重组酶聚合酶扩增反应在恒温条件下即可进行，无需PCR仪等温度循环仪器，不受实验空间限制；本发明的扩增反应在10至60分钟即可完成，远快于PCR技术或其他等温扩增技术。
- 合成核酸的方法和设备-201580054493.X
- J·W·爱夫卡维茨 - 分子组装公司
- 2015-08-18 - 2017-08-29 - C12P19/34
- 本发明提供改进的使用酶和特别设计的核苷酸类似物合成如DNA和RNA的聚核苷酸的方法。使用本发明方法，特定聚核苷酸序列可以在水溶液环境中在不使用核酸模板下从头一个碱基接一个碱基地合成。因为该等核苷酸类似物具有未经修饰的3'OH，即如“天然”脱氧核苷和核糖分子中所见，所以该等类似物产生适用于并入到生物系统中的天然聚核苷酸。
- 核酸分子的生成-201611191085.1
- D·J·帕克;K·F·波特;Z·卡恩 - 杰纳罗生物系统有限公司
- 2008-02-01 - 2017-08-25 - C12P19/34
- 本发明在广义上涉及在增强型固相多核苷酸扩增后生成单链核酸分子的方法。本发明应用使用这样的引物的扩增反应，即在特定退火条件下具有不同引发特性的引物或者嵌套于两个水相引物之间的固定引物。因此，通过引物设计，与水相引物相比提高了固相载体引物的参与。本发明还提供了以单链及双链核酸分子标记固体基质的方法。用于生成单链核酸分子及用于进行扩增反应的试剂盒也形成本发明的一部分。本发明还提供了用于生成任选地以报告分子标记的单链核酸分子的扩增体系，以及它们尤其作为标签、引物和探针的用途。
- 探针文库构建-201580051029.5
- 庄小威;J·R·墨菲特;A·波蒂格 - 哈佛学院院长及董事
- 2015-07-29 - 2017-08-18 - C12P19/34
- 本发明一般涉及用于产生核酸的系统和方法。在一些方面，可以产生相对大量的寡核苷酸，并且在一些情况下，寡核苷酸可以具有多种不同的序列和/或长度。例如，可以扩增相对少量的寡核苷酸以产生大量的核苷酸。在一组实施方案中，可以使用PCR扩增寡核苷酸，然后转录以产生RNA。然后可以将RNA逆转录以产生DNA，并且任选地，相对于DNA可以选择性地降解或除去RNA。在一组实施方案中，寡核苷酸可以是化学修饰的。这些修饰可以包括但不限于添加荧光染料或其它信号传导实体。
- 含氧萜烯的生产方法-201580057470.4
- 阿吉库玛·帕拉伊尔·库马兰;林敬尧;李立伟;苏维克·高希;克里斯多夫·皮里;安东尼·库阿利 - 马努斯生物合成股份有限公司
- 2015-08-21 - 2017-08-01 - C12P19/34
- 本发明涉及生产含氧的萜类的方法。还提供了在这些方法中使用的多核苷酸、衍生酶和宿主细胞。
- 一种离子浓度响应的DNA结构元件及制备和应用-201611183868.5
- 何丹农;王萍;刘婷;徐艳;陈益;金彩虹 - 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
- 2016-12-20 - 2017-06-13 - C12P19/34
- 本发明涉及一种离子浓度响应的DNA结构元件及制备和应用，包括DNA三角形折纸结构的合成、DNA四边形折纸结构的合成和改变离子浓度并用原子力显微镜观察DNA结构变化。具体涉及了以DNA三角形折纸结构和DNA四边形折纸结构为元件，并且这两种DNA结构皆具备可逆的离子响应功能。本发明提出了2种离子浓度响应的DNA二维折纸结构，该结构在溶液离子浓度变化时，可以随之发生可逆的结构变化；该DNA结构元件结构精确可控，易于修饰，具备良好的生物相容性；本发明中的制备方法简单，可操作性强，能进一步满足生物芯片以及纳米器件的制作需求。
- 选择性扩增核酸序列-201480073756.7
- 周小川;朱奇;张小林;盛苨晶 - LC科学有限责任公司
- 2014-11-26 - 2017-04-19 - C12P19/34
- 本发明涉及包括PCR的核酸序列复制领域。具体而言，本发明涉及用于从一个或多个模板序列中扩增一个或多个靶序列的方法和组分。特别是，本发明提供了新的引物设计，以提高PCR反应的特异性。本发明还提供了在一个反应管中通过使用特异性引物进行特定序列部分筛选以及使用一对通用引物扩增所有选定的序列部分的方法和组分。
- 在基因沉默中具有降低的脱靶效应的UNA寡聚物-201580027041.2
- 立川洁;约瑟夫·E·佩恩;帕德马纳巴·契吾库拉 - 阿克丘勒斯治疗公司
- 2015-03-24 - 2017-02-22 - C12P19/34
- 本发明提供用于以降低的脱靶效应进行基因沉默的UNA寡聚物。所述UNA寡聚物可以含有第一链和第二链，每条链长度为19‑29个单体，所述单体为UNA单体和不同的核酸单体。实施方案包括药物组合物和用于通过向对象施用UNA寡聚物来以降低的脱靶效应治疗或预防TTR相关淀粉样变性的方法。
- 一种利用T4噬菌体DNA拓扑异构酶I连接DNA片段的方法-201610596497.7
- 张存清;李成栋 - 上海毕傲图生物科技有限公司
- 2016-07-27 - 2016-12-07 - C12P19/34
- 本发明公开了一种利用T4噬菌体DNA拓扑异构酶I连接DNA片段的方法，步骤一，设计引物：对至少两个待连接的DNA片段分别设计引物；步骤二，片段扩增：将相应的待连接DNA片段为模板，以各自的引物进行PCR扩增，得到扩增产物，然后对扩增产物进行纯化；步骤三，片段连接。本发明提供的DNA片段连接方法利用了T4噬菌体DNA拓扑异构酶I同时实现酶切与连接的功能，传统的方法需要先利用限制性内切酶使DNA片段产生相匹配的末端，纯化后利用T4连接酶连接片段，因此具有更快捷高效的特点，本发明的方法中待连接片段内部的序列不会对连接产生影响，消除了传统方法中酶切步骤的缺陷。
- 专利分类
