[发明专利]混合石蜡、PCR反应试剂的保存方法以及反应试剂盒

权利要求书

1.一种PCR反应试剂的保存方法，PCR反应试剂中含有酶和其他必要成 份，其特征在于，该方法为利用混合石蜡将PCR反应试剂中的酶与其他成份隔 离，所述混合石蜡由液体石蜡和熔化后的固体石蜡均匀混合而成，其中，所述 固体石蜡选自熔点高于50℃的固体石蜡，固体石蜡和液体石蜡的比值为1∶4～1∶ 12(w/v)。

2.如权利要求1所述的PCR反应试剂的保存方法，其特征在于，所述固 体石蜡和液体石蜡的比值为1∶7～1∶9(w/v)。

3.如权利要求1所述的PCR反应试剂的保存方法，其特征在于，所述固 体石蜡为切片石蜡。

4.如权利要求1所述反应试剂的保存方法，其特征在于，所述反应试剂包 括第一反应液和第二反应液，所述第一反应液包括8～15mM的Tris-Cl和 45～55mM的KCl，0.2～0.4mM的dNTPs；2.5～4.0mM的MgCl₂，0.1～0.3μM的 引物，0.2～0.5μM的探针，以及余量灭菌水；第二反应液为所述酶，所述酶为 Taq酶，在反应容器中加入第一反应液后，将所述混合石蜡灭菌且熔化后加入 反应容器，待混合石蜡凝固将反应液覆盖后，加入第二反应液并将反应容器口 密封。

5.如权利要求4所述PCR反应试剂的保存方法，所述第二反应液中酶还 包括UNG酶。

6.一种PCR反应试剂盒，包括反应容器及置于反应容器中的反应液，所 述反应液包括酶和其他必要成份，其特征在于，所述PCR反应试剂盒中还包括 用于将反应液中酶和其他成分隔离的混合石蜡，所述混合石蜡由液体石蜡和熔 化后的固体石蜡均匀混合而成，其中，所述固体石蜡选自熔点高于50℃的固体 石蜡，固体石蜡和液体石蜡的比值为1∶4～1∶12(w/v)。

7.如权利要求6所述PCR反应试剂盒，其特征在于，所述反应液包括第 一反应液和第二反应液，所述第二反应液为所述酶，所述酶包括Taq酶和UNG 酶。

8.如权利要求6所述PCR反应试剂盒，其特征在于，所述固体石蜡和液 体石蜡的比值为1∶7～1∶9(w/v)。

9.如权利要求6所述PCR反应试剂盒，其特征在于，所述固体石蜡为切 片石蜡。

10.如权利要求7所述PCR反应试剂盒，其特征在于，所述第二反应液 为1～5unit Taq酶和0.008-0.1unit UNG酶。

11.如权利要求7所述PCR反应试剂盒，其特征在于，所述第一反应液 包括10mM的Tris-Cl和50mM的KCl，0.25mM的dNTPs，3.5mM的MgCl₂， 0.1μM的引物，0.22μM或0.4μM的探针，以及余量灭菌水。