[发明专利]一种检测A群轮状病毒的试剂盒和寡核苷酸序列有效

专利信息
申请号: 200910180005.6 申请日: 2009-10-21
公开(公告)号: CN101671746A 公开(公告)日: 2010-03-17
发明(设计)人: 魏海燕;曾静;王金花;周琦;张西萌 申请(专利权)人: 中华人民共和国北京出入境检验检疫局
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
代理公司: 北京正理专利代理有限公司 代理人: 王德桢
地址: 100026*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 轮状病毒 试剂盒 寡核苷酸 序列
【权利要求书】:

1.一组检测A群轮状病毒的寡核苷酸,其特征在于:由序列表SEQ ID No.1至 序列表SEQ ID No.5所示碱基序列的寡核苷酸组成;其中SEQ ID No.1为外侧上游引 物,SEQ ID No.2为外侧下游引物,SEQ ID No.3为内侧上游引物,SEQ ID No.4为内 侧下游引物,SEQ ID No.5为环引物。

2.一种检测A群轮状病毒的试剂盒,其特征在于:由以下试剂组成:

(1)TRIZOL裂解液;

(2)DEPC水;

(3)2×RT-LAMP反应液:其组分为:2×ThermoPol缓冲液、1.6M甜菜碱、3.6mM dNTPs、8mM MgSO4、0.4μM外侧上游引物、0.4μM外侧下游引物、3.2μM内侧上游引 物、3.2μM内侧下游引物、1.6μM环引物;外侧上游引物是序列表SEQ ID No.1所示的核 苷酸序列,外侧下游引物是序列表SEQ ID No.2所示的核苷酸序列,内侧上游引物是序 列表SEQ ID No.3所示的核苷酸序列,内侧下游引物是序列表SEQ ID No.4所示的核苷酸 序列,环引物是序列表SEQ ID No.5所示的核苷酸序列;

(4)Bst DNA聚合酶;

(5)AMV反转录酶;

(6)阴性对照:生理盐水;

(7)阳性对照:体外转录的A群轮状病毒RNA片段或含A群轮状病毒靶基因的质粒 DNA;

(8)显色液:SYBR Green I染料;

其中,所述2×RT-LAMP反应液中,2×ThermoPol缓冲液含有0.2%Triton X-100、20 mM(NH4)2SO4、20mM KCl、4mM MgSO4和pH 8.8的40mM Tris-HCl。

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