[发明专利]微波结合酶法破酵母细胞壁

权利要求书

1.微波结合酶法破酵母细胞壁，其特征包括以下几个步骤：

(1)酵母菌培养

将斜面培养基上的酵母菌接种到装有300ml液体培养基的锥形瓶中，置于30℃、180r.min^-1转速的恒温震荡培养箱中培养20h。

将培养液分成5份接种到新的无菌培养液中，置于30℃、180r.min^-1转速的恒温震荡培养箱中培养30h。

(2)复合酶破壁

取一份培养液加入1.8g蜗牛菌，用HCl调节PH至5.0，控制温度45℃，180r.min^-1转速下破壁6h。

(3)微波加热破壁

将培养液离心(3600n/min)10min，得到酵母沉淀，置于冷冻箱中冷冻20min。将冻结的酵母沉淀放入频率2450MHZ、输出功率750W的微波炉中处理30S。此时酵母由固体逐渐变成为液体。

2.如权利(1)所诉酵母菌的培养，其特征在于所用的培养基为液体种子培养基[3％葡萄糖+1％玉米浆+0.2无机营养盐(营养盐的加量按C＝8∶1或50ml/l)]。营养盐的组成：(NH₄)₂SO₄ 14g/l，KH₂PO₄ 20g/l，CaCl₂.2H₂O 4g/l，MgSO₄1.5g/l。

3.如权利(2)所诉复合酶破壁，其特征在于所用的复合酶是蜗牛酶，蜗牛酶是一种混合酶，其中包括纤维素酶、蛋白水解酶和果胶酶等，有三、四十种之多。

4.如权利(2)所诉复合酶破壁，其特征在于最经济的破壁条件为蜗牛酶的加入量为6mg/ml，温度控制45℃时。

5.如权利(3)所诉微波加热破壁，其特征在于微波加热的最大收益条件为2450MHZ的频率、功率为750W反应30S左右。