[发明专利]利用重组运动发酵单胞菌发酵木糖产燃料乙醇的方法无效
| 申请号: | 200910148258.5 | 申请日: | 2009-06-19 |
| 公开(公告)号: | CN101899476A | 公开(公告)日: | 2010-12-01 |
| 发明(设计)人: | 咸漠;杨建明;刘炜;徐鑫;孟鑫;姜兴林;郑艳宁;曹玉锦 | 申请(专利权)人: | 青岛生物能源与过程研究所 |
| 主分类号: | C12P7/06 | 分类号: | C12P7/06;C12N1/21;C12R1/01 |
| 代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 周长兴 |
| 地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 利用 重组 运动 发酵 单胞菌 木糖产 燃料 乙醇 方法 | ||
1.一种利用重组运动发酵单胞菌发酵木糖产燃料乙醇的方法,主要步骤为:
A)将重组运动发酵单胞菌接种到卡那霉素或氨苄青霉素的T液体培养液中,于20-30℃下培养至OD600=1.0时,取上清液;
B)将上清液加入水后收集馏出液,用气相色谱测定乙醇浓度。
2.如权利要求1所述的方法,其中,步骤A所述T液体培养液为100mL内含30-50μg·mL-1的卡那霉素或氨苄青霉素。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中,步骤A所述的T液体培养液含有:酵母提取物、KH2PO4、MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4和木糖。
4.如权利要求3所述的方法,其中,所述酵母提取物为10g/L、KH2PO4为2g/L、MgSO4·7H2O为1g/L、(NH4)2SO4为1g/L、木糖为20g/L。
5.如权利要求1所述的方法,其中,步骤A所述的接种是按体积比1%的接种量接种到T液体培养液。
6.如权利要求1所述的方法,其中,步骤A所述r的取上清液是将培养液在8000-1000rpm条件下,离心5-10分钟后取上清液。
7.如权利要求1所述的方法,其中,步骤A所述的重组运动发酵单胞菌,是以不同细菌基因组DNA为模版,PCR扩增获得目的基因,酶切后,连接到载体pUC19,pZB21上,转入运动发酵单胞菌中,筛选获得阳性重组质粒,重组质粒在运动发酵单胞菌中表达后,获得重组运动发酵单胞菌。
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