[发明专利]一种可溯源酶校准物质的制备方法

权利要求书

1、一种可溯源酶校准物质的制备方法，其特征在于它包括：1、人源性血清酶基因克隆以及表达；2、高纯度基因重组血清酶的纯化；3、互换性良好的基质物质制备；4、校准物质候选物互换性验证；5、分装后均一性测定；6、冷冻干燥。

2、根据权利要求1所述的可溯源酶校准物质的制备方法，其特征在于所述的人源性血清酶基因克隆以及表达是：酶基因表达载体pET21b-HMCK具体构建过程以及蛋白质优化表达。

3、根据权利要求1所述的可溯源酶校准物质的制备方法，其特征在于所述的高纯度基因重组血清酶的纯化主要通过三个反应步骤完成酶的高纯度蛋白：第一分级分离；阴离子交换层析；第三分子筛凝胶层析；然后测定并去除杂酶。

4、根据权利要求1所述的可溯源酶校准物质的制备方法，其特征在于所述的互换性良好的基质物质制备是以健康人血清为基质原料制备各种血清酶的校准物质，希望得到与临床各种血清样本互换性好的较准物质；它包括基质物质制备和酶血清基质物质评估。

5、根据权利要求1所述的可溯源酶校准物质的制备方法，其特征在于所述的校准物质候选物互换性验证主要包括：血清基质成分酶标准物质和校准物质候选物互换性分析。

6、根据权利要求1所述的可溯源酶校准物质的制备方法，其特征在于所述的分装及均一性测定，它是在无菌条件下，以经过计量的移液枪进行定量分装，分装后随即取样20瓶，用cfas作为校准品，采用Roche-7170系统常规方法进行测定；分别测定20瓶样本的混合瓶样本以及单瓶样本；其中混合瓶样本测定40次，单瓶样本各测定2次；经过统计后确定分装样本是否均匀；所述的冷冻干燥是在确认样本均一性良好的基础上，于-80℃预冻10小时，立即转入真空冷冻干燥机内进行冷冻干燥，完毕后进行在位压盖并于-20℃下保存。