[发明专利]一种K4多肽合成产物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物医药领域中的多肽药物的开发，具体涉及到设计和制备一种4拷贝分支肽在临床上可抑制肿瘤生长和免疫增强剂上的应用。

背景技术

生物体的遗传基因被存储在多聚核苷酸链上，遗传基因编码着执行生物学功能的蛋白质。生物体内的蛋白质多种多样，它们行使着各种生物学功能维持生命活动。蛋白质的种类虽然多不胜举，但它们基本上都是由20个自然界存在的天然氨基酸组成。由于氨基酸的组成和排列顺序的差异导致了蛋白质的千差万别。一般来说，含有50个以上氨基酸的分子被称为蛋白质，般超过10个氨基酸的肽链被称为多肽，少于10个氨基酸的肽链被称做寡肽。目前发现最小的功能小肽只有2个氨基酸，通常较为常见的是4个以上的功能小肽。

由于人类基因组计划的完成和人类蛋白组计划的开展，将会有越来越多的蛋白质功能片段被发现并被作为药物应用到生物医药领域中来。蛋白质的功能片段通常是指被发现具备某种特定生物学功能的直链多肽片段，它们通常是几十个至两个氨基酸组成的肽类片段，被鉴定和发现的蛋白质功能片段可通过人工合成的途径制备。现已开发并在临床上得到应用的多肽药物有“催产素”、“胸腺肽α1”、“胸腺五肽”等，有在天然肽链的基础上进行人工改构制备成为用于治疗消化道出血和肢端肥大症的多肽药物“奥曲肽”和抗凝血作用的“水蛭肽”等。蛋白质中的功能片段常常能筛选到含有几十个或小到只有二个氨基酸组成的多肽片段，它们为人工合成多肽功能片段并将它们投入应用奠定了基础。

在蛋白质、多肽或寡肽中，单一氨基酸的缺失、增加或被替换；氨基端(N端)或羧基端(C端)被封闭；序列中或游离端被化学基团修饰都会使得蛋白质、多肽或寡肽原有的生物活性发生不可预知的改变。设计、筛选和发现具有新的功能肽段或寻找高效肽段是药物开发的一个重要环节。

一段含有4个氨基酸的寡肽苏氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸(Thr-Lys-Leu-Lys，或TKLK)被发现具有和脾脏产生的生物活性小肽Tuftsin苏氨酸-赖氨酸-脯氨酸-精氨酸(Thr-Lys-Pro-Arg，或TKPR)具有相近似的生物活性作用(United States Patent：5,028,593，filed：August15，1989)。实验证明Tuftsin能使脾内脾小体增多，生发中心生长活跃，增强粒细胞、单核细胞、巨噬细胞，自然杀伤细胞的趋化、游离、吞噬和产生细胞毒等作用，提高淋巴系统的细胞免疫功能。Tuftsin不仅促进单核吞噬细胞的MHC非限制性功能，还促进其限制性的抗原递呈功能，提高细胞毒作用。

本发明涉及设计和制备一种含有4拷贝TKLK片段的肽类分子以进一步有效提高其免疫功能及抗肿瘤活性，开发一种可在临床应用的抗肿瘤药物和免疫增强剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种4拷贝分支肽及其在抑制肿瘤生长的药物和免疫增强剂上的应用，所要解决的技术问题是使该4拷贝分支肽不仅保留功能寡肽的生物学活性而且显著提高其生物学活性。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。本发明提出一种4拷贝分支肽，是将具有该氨基酸序列特征组成的寡肽片段通过具有2个活化氨基可供进行氨基酸加成缩合反应的赖氨酸(Lys，用＞K-表示)连接的桥梁链制备成4拷贝分支分子，其结构通式为：(X_A-X_B-X_C-X_D-X₁)₄＞(K-X₂)₂＞K-X₃，其中，X_A代表极性不荷电氨基酸，包括丝氨酸(Ser，S)、苏氨酸(Thr，T)、半胱氨酸(Cys，C)、脯氨酸(Pro，P)、谷氨酰胺(Gln，Q)、天门冬酰胺(Asn，N)；X_B和X_D代表碱性氨基酸，包括组氨酸(His，H)、赖氨酸(Lys，K)、精氨酸(Arg，R)；X_c代表非极性脂肪族氨基酸，包括甘氨酸(Gly，G)、丙氨酸(Ala，A)、缬氨酸(Valine，V)、亮氨酸(Leu，L)、异亮氨酸(Ile，I)、蛋氨酸(Met，M)。