[发明专利]检测融合基因Bcl2-IgH重排的试剂盒

权利要求书

1.一种检测样品中Bcl2-IgH融合基因重排的试剂盒，试剂盒包括：(1)分别装有DNA提取液、经焦碳酸乙二酯处理的纯水、PCR扩增反应液、阴性对照样品、阳性定量参考品并加盖密封的多个试剂瓶或管，和(2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中PCR扩增反应液包括正向引物、反向引物、两末端分别结合的有荧光发生基团和荧光淬灭基团的寡核苷酸探针、dNTPs、耐热DNA聚合酶、PCR缓冲液和水，其特征在于所使用的正反向引物的序列分别为：5’-GCTTTACGTGGCCTGTTTCA-3’和5′-CCTGGCTTCCTTCCCTCTGT-3’，寡核苷酸探针序列为：5’-ACCTGAGGAGACGGTGACC-3’。

2.根据权利要求1的试剂盒，其特征在于PCR扩增反应液所使用的正反向引物的序列还可以为：5’-TTAGAGAGTTGCTTTACGTG-3’、5′-ACCTGAGGAGACGGTGACCAGGGT-3’，寡核苷酸探针序列还可以为：5’-AGGGCTCTGGGTGGGTCTGTGTTG-3’。

3.根据权利要求1的试剂盒，其特征在于PCR扩增反应液所使用的正反向引物的序列还可以为：5’-CAACACAGACCCACCCAGAG-3’，5’-AGTTGCTTTACGTGGCCT-3’，寡核苷酸探针序列还可以为：5’-AGGGCTCTGGGTGGGTCTGTGTTG-3’。

4.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于PCR缓冲液包含10mM Tris-HCl(pH8.0)、150mMKCl、5mM MgCl₂，每微升的PCR缓冲液中加入2单位Taq酶。

5.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于阳性定量参考品为携带有BCL2-IgH序列的重组质粒，质粒由上下游引物扩增的PCR产物通过市售的载体克隆构建而成，所使用的上下游引物的组合可以是SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，或SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5，或SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8。

6.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于试剂盒的核酸扩增系统是采用聚合酶链反应，并且所说的扩增反应循环是重复30-50次的聚合酶链反应循环。