[发明专利]微生物发酵产物的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及作为制造3a，6，6，9a-四甲基十二氢萘并[2，1-b]呋喃的中间体有用的二醇的制造方法。 

背景技术

3a，6，6，9a-四甲基十二氢萘并[2，1-b]呋喃(下面记作“化合物A”)是抹香鲸体内产生的病态分泌物龙涎香中所包含的香气成分，是作为琥珀(Amber)类合成香料不可缺的重要化合物。化合物A主要以提取自硬膜鼠尾草(Salvia sclarea L.)的香紫苏醇作为起始原料，通过化学合成法来制造。作为化合物A的中间体，已知有3a，6，6，9a-四甲基十氢萘并[2，1-b]呋喃-2(1H)-酮(下面记作“香紫苏内酯(Sclareolide)”)以及1-(2-羟乙基)-2，5，5，8a-四甲基十氢萘-2-醇(下面记作“二醇”)。 

但是，上述化学合成法对环境负荷大，并且存在无法充分确保收率、纯度的问题。因此，已报道有从香紫苏醇经由微生物转化得到化合物A中间体，再使其环化制造化合物A的方法(例如专利文献1及2)。 

专利文献1：特开平3-224478号公报 

专利文献2：特开昭62-74281号公报 

发明内容

本发明提供式(2)所示的1-(2-羟乙基)-2，5，5，8a-四甲基十氢萘-2-醇的制造方法，其特征在于，将下式(1a)和/或(1b)所示的化合物作为基质通过微生物转化得到培养液，将该培养液用筛孔度为10～100μm的过滤器过滤后，用水或用SP值不为8.3～20(cal/cm³)^1/2的溶剂洗涤过滤器上的残渣，然后将得到的滤饼溶解在SP值为8.3～20(cal/cm³)^1/2的溶剂中，然后过滤或离心分离溶解液。 

附图说明

图1是表示培养液3的组成，以及将培养液3过滤后、水洗后(实施例12)的组成，以及将培养液3通过乙酸乙酯提取法(比较例9)得到的提取液的组成的图。 

具体实施方式

在上述专利文献1及2中，通过微生物转化所得到的二醇的分离、精制是通过将培养液经乙酸乙酯进行溶剂提取后，将干燥得到的提取物溶解在温热的己烷/乙酸乙酯或己烷/氯仿中，通过从溶解液结晶化，而进行。但是，由于培养液中除了二醇以外，还混有未反应的香紫苏醇和香紫苏内酯、培养基成分等，在使用乙酸乙酯等的现有的溶剂提取法中，二醇以外的其他成分也同时被回收，只进行二醇的分离、精制非常困难。而且，虽然参照香紫苏内酯的精制方法(美国专利第5,945,546号说明书)来进行溶剂提取后，用酸或碱溶液洗涤可以得到色相改善的效果，但是其组成几乎没有变化，无法得到高纯度的二醇。 

因此，本发明涉及能够高效地制造高纯度的二醇的二醇的制造方法。 

本发明人对二醇的分离精制手段进行了研究，发现：尽管二醇和香紫苏内酯均不溶于水，可是用特定筛目的过滤器过滤培养液后，再经过水洗，可以将二者分离。还发现：二醇相对于乙醇等特定溶剂的溶解度较大，通过将水洗后得到的滤饼溶解在这些溶剂中，能够除去杂质，并能够高收率地回收高纯度的二醇。 

根据本发明，能够高效地以高纯度制造作为化合物A的制造中间 体有用的二醇。 

在本发明中，作为微生物转化所利用的微生物，只要是具有将上上述式(1a)和/或(1b)所示的化合物作为基质来生成作为化合物A中间体的二醇的能力，就没有特别限制，可以举出，例如属于子囊菌纲(Ascomycetes)的微生物、属于隐球菌(Cryptococcus)属的微生物、属于担子菌纲的微生物、属于ハイホジ一マ(Hyphozyma)属的微生物等。其中，从作为化合物A中间体的二醇的生成效率的观点出发，优选属于子囊菌纲的微生物和属于Hyphozyma属的微生物。作为属于子囊菌纲的微生物，可以举出，例如命名为Ascomycete sp.KSM-JL2842的、作为FERM P-20759而被保藏在独立行政法人产业技术综合研究所的专利生物保藏中心的微生物。作为属于Hyphozyma属的微生物，可以举出例如专利第2547713号说明书中记载的ATCC20624菌株。