[发明专利]含有山梨糖醇的蛋白质调配物

说明书

相关申请案

本申请案主张2007年2月16日申请的美国临时专利申请案第60/901,811号的权益，所述专利以全文引用的方式并入本文中。

技术领域

本发明涉及贮藏和制备含有山梨糖醇的蛋白质调配物的方法。

背景技术

甘露糖醇已普遍用于蛋白质调配物中来维持调配物的稳定性和等渗性。过去，使用液氮快速冷冻蛋白质调配物以备贮藏。然而，大规模不受控冷冻液体调配物的几乎所有方法都遭受不受控凝固和熔化的负作用。已显示相变的控制不当导致由聚集、沉淀、氧化和变性引起的产品损失。已引入最新技术来控制蛋白质调配物的冷冻和融化过程。然而，这些技术的冷冻和融化速率通常非常慢。因此，在含有甘露糖醇的蛋白质调配物中，缓慢的冷冻-融化过程使得甘露糖醇结晶，这转而又诱发蛋白质聚集。

为了避免在缓慢的冷冻-融化过程期间甘露糖醇所诱发的蛋白质聚集，现有方法需要从蛋白质调配物中去除甘露糖醇并且在融化后操作期间将其添加回去。这些方法花费大且需要额外的加工时间。因此，需要贮藏和制备含有甘露糖醇的蛋白质调配物的改良方法。

发明内容

本发明提供一种贮藏和制备蛋白质调配物的改良方法。具体来说，本发明的方法在蛋白质调配物中使用山梨糖醇来抑制冷冻和融化期间的蛋白质聚集。由此，本发明消除对在例如药品贮藏和填充操作期间去除和添加甘露糖醇的需要。因此，本发明降低与贮藏和制备蛋白质调配物相关的成本且减少加工时间。

一方面，本发明提供一种贮藏液体调配物的方法，其包括使所述液体调配物逐渐冷冻到低于-10℃的温度。液体调配物包括蛋白质和山梨糖醇以使山梨糖醇的存在抑制冷冻期间的蛋白质聚集。

具体来说，本发明的方法包括使液体调配物逐渐冷冻到低于例如-20℃、-30℃、-40℃、-50℃、-70℃或-80℃的温度。在一个实施例中，所述温度等于或低于-30℃。在另一个实施例中，温度等于或低于-40℃。在又一个实施例中，温度等于或低于-50℃。在又一个实施例中，温度等于或低于-80℃。

山梨糖醇可以任何浓度存在。山梨糖醇通常以不大于约4.5M的浓度存在于本发明的液体调配物中。在一些实施例中，山梨糖醇的浓度不大于约300mM。在一特定实施例中，山梨糖醇的浓度为约300mM。在一些实施例中，本发明的液体调配物不含甘露糖醇。

在一些实施例中，本发明的方法包括以0.6到0.1℃/分钟范围内的速率(例如约0.6、0.5、0.4、0.3、0.2或0.1℃/分钟的速率)使液体调配物逐渐冷冻。

在一些实施例中，液体调配物含有为抗体的蛋白质。具体来说，所述抗体是单克隆抗体。在其它实施例中，液体调配物含有为医药药物的蛋白质。

在一些实施例中，贮藏本发明的液体调配物的方法是中间过程。

另一方面，本发明提供一种制备液体调配物的方法，其包括使所述液体调配物从冷冻状态逐渐融化到高于约0℃的温度。液体调配物含有蛋白质和山梨糖醇以使山梨糖醇的存在抑制融化期间的蛋白质聚集。

在一些实施例中，本发明的方法包括使液体调配物从冷冻状态逐渐融化到高于约10℃、20℃、25℃、30℃或高于30℃(例如37℃)的温度。

山梨糖醇可以任何浓度存在。山梨糖醇通常以介于约0-4.5M之间的浓度存在于本发明的液体调配物中。在一些实施例中，山梨糖醇的浓度介于约0-300mM之间。在一特定实施例中，山梨糖醇的浓度为约300mM。在一些实施例中，本发明的液体调配物不含甘露糖醇。

在一些实施例中，本发明的方法包括以0.6到0.1℃/分钟范围内的速率(例如约0.6、0.5、0.4、0.3、0.2或0.1℃/分钟的速率)使液体调配物逐渐融化。

在一些实施例中，液体调配物含有为抗体的蛋白质。具体来说，所述抗体是单克隆抗体。在其它实施例中，液体调配物含有为医药药物的蛋白质。

在一些实施例中，制备本发明的液体调配物的方法是中间过程。

在一些实施例中，根据本发明的液体调配物是水性调配物。

本发明进一步提供一种组合物，其含有如以上各种实施例中所述通过本发明的方法制备的液体调配物中的生物有效量的蛋白质。

另一方面，本发明提供一种在液体调配物中贮藏蛋白质的方法，其包括：(a)向所述液体调配物提供山梨糖醇；(b)使液体调配物逐渐冷冻；(c)使液体调配物逐渐融化；且其中山梨糖醇的存在抑制冷冻-融化期间的蛋白质聚集。