[发明专利]心脑浸液中和营养培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种心脑浸液中和营养培养基，其主要成分是牛心浸液、犊牛脑浸液、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、对氨基苯甲酸溶液、硫酸镁溶液经一定的工艺制成。临床对已治疗的患者的标本需经培养才能证实是否痊愈。心脑浸液中和营养培养基能够检测临床大量使用抗生素后的不同菌属阳性结果，此培养基营养丰富，常用于营养要求较高的细菌分离培养。细菌接种分离培养好坏，会直接影响检测结果。往往需要将样本通过不同方法进行分离培养，来进行细菌种类的鉴别，这是目前微生物实验室最常用的手段。由于目前培养条件的应用范围所限，供一般标本的分离培养用的培养基没有特效的，存在所分离培养基营养不足、培养时间长、易出现假阳性或假阴性等问题。随着生物研究的进展，国内外对细菌鉴别的培养基研究也在不断的发展。传统常规检测诊断方法是先将样本进行细菌培养分离，选择标准典型菌株再进行血清学鉴定检测。整个检测确诊过程耗时长、治疗的患者临床又使用了抗生素，操作繁琐，试剂质量无法保证，严重影响了致病菌确认工作、对快速准确诊断，抢救病人带来极大的困难。本发明打破传统常规分步检测手段，特别是针对临床大量使用抗生素或大量使用消毒液的样本，在培养基中增加中和剂，从而减少由于检测手段落后而造成对人体健康的危害，较传统方法具有明显的应用价值，对指导临床诊断和治疗，防止滥用抗菌药物具有重要意义。

背景技术

本发明的目的在于提供一种能克服已有培养基不足的心脑浸液中和营养培养基。与其它同类培养基相比具备下列特点：营养丰富，用于临床标本营养要求较高的细菌，中和营养要求高的细菌增菌的规范鉴定。在培养基中增加中和剂，能够检测临床大量使用抗生素后的不同菌属阳性结果，灵敏度高。

发明内容

本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经混合、溶解、高温灭菌、冷却、分装等工艺而成一种心脑浸液中和营养培养基。

本发明选择的配方如下(组分及其重量百分比％)：犊牛脑浸液200-220mL；牛心浸液220-250mL；胰蛋白胨10.0-12.0；葡萄糖2.0-2.2；氯化钠5.0-5.5；磷酸氢二钠2.5-3.0；5g/L对氨基苯甲酸溶液4.0-5.0mL；1mol/L硫酸镁溶液18.0-20.0mL；蒸馏水加至1000ml。

本培养基含有丰富的营养成分，如犊牛脑浸液、牛心浸液、胰蛋白胨是培养基中的主要营养成分，可供营养要求较高的细菌生长，常用于纯种分离培养，在通常室温下或37℃培养，培养24小时后，即可纯种分离，或移种到选择性培养基上以分离致病菌。氯化钠用于调整渗透压；磷酸盐为细菌提供良好的磷源，兼有缓冲作用。对氨基苯甲酸中和血液中磺胺类药物的抑菌作用；硫酸镁破坏血液中存在的四环素、金霉素、新霉素、多黏菌素及链霉素的抑菌作用。配成的培养基呈淡黄色透明液体。质控菌株为脑膜炎奈瑟氏菌(ATCC3090)、肺炎链球菌(ATCC19615)、化脓性链球菌(ATCC6303)，质控菌株接种于此培养基后，经35±2℃培养18~24h，生长情况良好。

本发明产品的制备方法是：

1)、将胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、对氨基苯甲酸溶液、硫酸镁溶液、蒸馏水置于三角烧瓶内，混合；

2)、加热溶解，调pH7.3~7.5，以绒布过滤烧瓶内，后置于压力蒸气灭菌器内，121℃15min高压灭菌；

3)、取出后冷至50℃左右，加无菌的牛心浸液、犊牛脑浸液，轻轻摇匀，分装于试管，抽样于37℃培养18-24小时，如无细菌生长，冷藏备用。

本发明具有以下优点：(1)心脑浸液中和营养培养基，营养丰富、配制简单，可用于各种营养要求较高的细菌增菌培养；(2)选择性强、检出率高，临床应用效果满意，尤其是对排除大量使用抗生素的影响有显著作用；(3)较传统的培养基检测耗时短、特异性强、稳定性好。

具体实施方式

按照下表所列数据(重量百分比％)进行配置：

配方一：

犊牛脑浸液                  200-220mL

牛心浸液                    220-250mL

胰蛋白胨                    10.0-12.0

葡萄糖                      2.0-2.2

氯化钠                      5.0-5.5

磷酸氢二钠                  2.5-3.0

5g/L对氨基苯甲酸溶液        4.0-5.0mL