[发明专利]人犬尿氨酸酶基因的单核苷酸多态性组成的单倍型

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学和医学领域。更具体地涉及人犬尿氨酸酶(kynureninase，KYNU)基因的单核苷酸多态性(single nucleotidepolymorphism，SNP)组成的单倍型(haplotype)。本发明还涉及检测这些SNP组成的单倍型的方法和试剂盒。

背景技术

原发性高血压(essential hypertension，EH)是最常见的心血管疾病，其发病率逐年上升，并可引起严重的心、脑、肾并发症，是脑卒中和冠心病的主要危险因素。EH是一种由遗传因素和环境因素相互作用而发病的多基因病，寻找EH相关基因进而阐明高血压发病的遗传机制已经成为目前研究的热点(Harrap SB.Hypertension：genes versusenvironment.Lancet，1994，344：169-171)。

定位克隆法是研究EH遗传机制的主要研究之一，即利用一定数量的覆盖整个基因组的微卫星引物，对大样本家系或同胞对进行连锁分析，而将EH易感基因位点定位到某一染色体区域。上海市高血压研究所已完成对上海地区汉族高血压家系的全基因扫描，研究提示2q14-q23区域与高血压存在紧密连锁关系(Zhu DL，Wang HY，XiongMM，et al.Linkage of hypertension to chromosome 2q14-q23 in Chinesefamilies.J Hypertens 2001；19：55-61)，然而并没有确定该区域内哪个基因为EH易感基因。KYNU基因即该定位区域内的候选基因，但目前没有证实KYNU基因单倍型与原发性高血压相关性的报道。

综上所述，为了最终实现治疗高血压，本领域迫切需要寻找原发性高血压易感基因，并开发检测原发性高血压的方法、试剂盒，以及相关的治疗药物。

发明内容

本发明人经过多年研究，首次发现和证明了KYNU基因单倍型与高血压密切相关，而且发现了它的新功能：KYNU基因的改变将导致高血压，其中关联研究结果显示，在KYNU第-8091位的SNP1(A/T)、第-7974位的SNP2(G/A)、第70764位的SNP3(T/A)组成的单倍型在病例和对照组中的分布存在显著性差异。在此基础上完成了本发明。

本发明的目的是提供一种检测KYNU基因的SNP1、SNP2和SNP3组成的单倍型的方法。

本发明的另一目的是提供一种原发性高血压易感性检测试剂盒。

本发明的再一目的是提供一种治疗高血压的药物组合物。

本发明人找到了与高血压关联的KYNU基因的SNP标记，所述SNP标记包括位点位于KYNU基因第-8091位的SNP1、第-7974位的SNP2和第70764位的SNP3。

同时，获得了与高血压关联的KYNU基因的单倍型，其是上述的SNP标记组成的单倍型，包括A-G-T、A-G-A、A-A-T、A-A-A和T-G-T。

本发明提供了一种测定个体中对高血压的易感性的方法，该方法包括检测上述与高血压关联的KYNU基因的单倍型。

本发明还提供了一种测定个体中对高血压的易感性的方法，该方法包括以下步骤：

从所述个体中获得DNA样品；

使用KYNUSNP1～3引物进行PCR扩增；

纯化PCR产物并测序；和

SNP基因分型和关联分析。

本发明还提供了一种原发性高血压易感性检测试剂盒，该试剂盒包含：

KYNUSNP1正向引物，其序列为SEQ ID NO：1；

KYNUSNP1反向引物，其序列为SEQ ID NO：2；

KYNUSNP2正向引物，其序列为SEQ ID NO：1；

KYNUSNP2反向引物，其序列为SEQ ID NO：2；

KYNUSNP3正向引物，其序列为SEQ ID NO：3；

KYNUSNP3反向引物，其序列为SEQ ID NO：4；

PCR反应液：含Taq酶、dNTP、镁离子和PCR反应缓冲液。

本发明还提供了一种治疗高血压的药物组合物，该组合物包含：

KYNU蛋白或其多肽；

药学上可接受的载体或赋形剂。