[发明专利]自动化进样分辨的化学发光多组分免疫检测系统及分析方法无效
申请号: | 200810024426.5 | 申请日: | 2008-03-24 |
公开(公告)号: | CN101545902A | 公开(公告)日: | 2009-09-30 |
发明(设计)人: | 严枫;刘宏;鞠熀先 | 申请(专利权)人: | 江苏省肿瘤医院;南京大学 |
主分类号: | G01N33/546 | 分类号: | G01N33/546;G01N21/76 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210009江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 自动化 分辨 化学 发光 组分 免疫 检测 系统 分析 方法 | ||
1.一种自动化进样分辨的化学发光多组分免疫检测系统,其特征在于该系统由 温育体系、多通道进样体系、溶液传输体系、信号采集体系和计算机所构成:其中温 育体系由1至4个内置微型搅拌子(2)和磁珠(3)的微型玻璃试管(1)与恒温磁 力搅拌器(11)组成,微型玻璃试管(1)放在恒温磁力搅拌器(11)中,在37℃ 恒温水浴及搅拌条件下进行免疫反应;多通道的进样体系由进样通道(4)、磁铁(12) 和玻璃管(13)组成,磁铁(12)放置在玻璃管(13)下,用来收集反应后的磁珠(3); 溶液传输体系由双向多通道蠕动泵(14)、连接管(10)、多功能注射阀(15)和多位 阀(16)组成,连接管连接进样体系,通过双向多通道蠕动泵(14)和多功能注射阀 (15)的一个通道,与第二洗涤缓冲液(21)和盐酸洗涤液(22)共同连接到多位阀 (16)上,通过第一出口(6)与另一个多位阀的入口(7)相连,入口(7)与第二 出口(8)以及底物液(19)、第一洗涤缓冲液(20)相连,多功能注射阀(15)的另 一通道与废液试管(5)相连;信号采集体系由检测通道(9)、平面镜(17)和光电 倍增管(18)组成,检测通道(9)的一头与多位阀的第二出口(8)相连,另一头与 回收试管(23)相连,用于回收磁珠(3),溶液传输体系与信号采集体系由计算机(24) 自动控制。
2.根据权利要求1所述的检测系统,其特征在于所述的双向多通道蠕动泵(14) 的转速、流体流速、和流动的方向通过计算机(24)进行自动调节。
3.根据权利要求1所述的检测系统,其特征在于所述的多功能注射阀(15)可 在计算机的控制下,通过转换通道使过量的反应试剂流入废液试管(5)中。
4.根据权利要求1所述的检测系统,其特征在于所述的多位阀(16)可通过转 动实现不同流路的切换,多位阀(16)的转动由计算机(24)控制。
5.根据权利要求1所述的检测系统,其特征在于所述的磁铁(12)用于收集温 育反应后的悬浮液中的磁珠(3)。
6.根据权利要求1所述的检测系统,其特征在于所述的多通道的进样体系是通 过多位阀控制的顺序注射来进行多通道检测的。
7.根据权利要求1所述的检测系统,其特征在于如下检测步骤:
①将样品、固定了对应抗体的磁珠(3)与碱性磷酸酶标记的抗体加入到温育体 系的玻璃试管(1)中,于37℃恒温水浴中搅拌温育,形成免疫夹心复合物;
②用蠕动泵(14)把磁珠(3)悬浮液经进样通道(4)通入玻璃管(13)中,在 磁铁(12)的作用下收集磁珠(3),并将过量的反应试剂通过多功能注射阀(15)的 一个通道流入废液试管(5)中;
③调节多功能注射阀(15),使用其另一通道,并使蠕动泵(14)反转,将第一 洗涤缓冲液(20)经由多位阀(16)流经各个玻璃管(13)对收集的磁珠(3)进行 洗涤,再将底物液(19)由相同的管道注入到各个玻璃管中,在撤去磁铁的情况下底 物与磁珠(3)混合形成悬浮液,并引发化学发光反应;
④磁珠(3)悬浮液在进行化学发光反应的同时,将蠕动泵(14)反转,使一个 通道的悬浮液通过多功能注射阀(15)、多位阀(16)的第二出口(8)流过检测通道
(9),由化学发光的强度来检测相应待测组分的浓度,调节多位阀(16),先后将盐 酸洗涤液(22)和第二洗涤缓冲液(21)通入检测通道以消除前一组分的信号残留, 再调节多位阀(16),以同样的方法检测另一通道待测物,检测后的磁珠(3)悬浮液 流入回收试管(23)进行回收;
⑤完成全检测过程后,将系统调节到初始状态,进入下一分析循环。
8.根据权利要求1所述的检测系统,其特征在于所述的的第一洗涤缓冲液(20) 以及第二洗涤缓冲液(21)为0.01M磷酸盐缓冲液,pH 7.4,含0.05%吐温-20;盐 酸洗涤液为0.1M 盐酸溶液;底物液(19)为disodium 3-(4-methoxyspiro{1,2-dioxetane-3,2’-(5’-chloro)tricyclo[3.3.1.13,7]decan}-4-yl)phenyl phosphate,CSPD。
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