[发明专利]使用与B细胞表面标志结合的拮抗剂治疗自身免疫病

说明书

本申请是中国申请00809834.4的分案申请，该母案于2000年5月4日以国际申请号PCT/US00/40018提交，于2001年12月30日进入中国国家阶段，本分案采用了与该母案一致的发明名称。

发明领域

本发明涉及使用与B细胞表面标志，如CD19或CD20结合的拮抗剂治疗自身免疫病。

发明背景

淋巴细胞是骨髓造血过程中产生的多种白细胞的一种。存在两种重要的淋巴细胞群：B淋巴细胞(B细胞)和T淋巴细胞(T细胞)。这里对淋巴细胞中的B细胞尤其有兴趣。

B细胞在骨髓中成熟，离开骨髓时在其细胞表面表达与抗原结合的抗体。当天然B细胞首次与其膜结合抗体特异的抗原相遇时，细胞开始迅速分裂，其子代分化成记忆B细胞和称为“浆细胞”的效应细胞。记忆B细胞寿命很长，并继续表达与其亲代细胞具有相同特异性的膜结合抗体。浆细胞不产生膜结合抗体，而代之产生可分泌型的抗体，可分泌的抗体是体液免疫的重要效应分子。

CD20抗原(也称为人B淋巴细胞限制性分化抗原Bp35)是前B细胞和成熟B淋巴细胞上的疏水性跨膜蛋白，分子量大约35kD(Valentine等生物学化学杂志264(19)：11282-11287(1989)；和Einfeld等，欧洲分子生物学组织杂志7(3)：711-717(1988))。该抗原也在大于90％的B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)上表达(Anderson等，血液63(6)：1424-1433(1984))，但在造血干细胞，原B细胞，正常浆细胞或其它正常组织中未发现(Tedder等，免疫学杂志135(2)：973-979，1985)。CD20在细胞周期启动和分化的活化过程早期阶段起调节作用(Tedder等，同上)，并可能发挥钙离子通道的功能。(Tedder等，细胞生物学杂志14D：195(1990))

由于CD20在B细胞淋巴瘤中表达，这一抗原可作为用于“靶向”这类淋巴瘤的候选者。实质上，这种靶向可如下归纳：给予患者B细胞表面抗原CD20的特异性抗体。这些抗CD20抗体与正常和恶性B细胞(表面的)CD20抗原特异结合；与表面抗原CD20结合的抗体可引起肿瘤性B细胞的破坏和耗竭。此外，具有破坏肿瘤潜力的化学制剂或放射活性标记能与抗CD20抗体偶联，从而将所述制剂特异性“运送”至肿瘤性B细胞。不管用什么方法，一个主要目的是破坏肿瘤；可根据所使用的具体抗CD20抗体确定具体方法，因此，靶向CD20抗原的现有方法很多。

CD19是B细胞系细胞表面表达的另一种抗原。象CD20一样，发现CD19在从干细胞阶段到快要最终分化为浆细胞之前的整个分化过程中均位于细胞上(Nadler，L.淋巴细胞分型II2：3-37和Appendix，Renling等，编(1986)Spring Verlag出版)。然而与CD20不同，与CD19结合的抗体引起CD19抗原的内在化。在多种抗体中使用HD237-CD19抗体(也称为B4抗体)可鉴定CD19抗原(Kiesel等，白血病研究II，12：1119(1987))。CD19抗原存在于4-8％的外周血单个核细胞及大于90％的分离自外周血，脾脏，淋巴结或扁桃体的B细胞。在外周血T细胞，单核细胞或粒细胞中未检出CD19。实际上，所有的非T细胞急性淋巴母细胞白血病(ALL)，B细胞慢性淋巴细胞白血病(CLL)和B细胞淋巴瘤均表达可被B4抗体检测的CD19(Nadler等，免疫学杂志131：244(1983)；和Nadler等，血液学进展，Vol.XIIpp.187-206.Brown，E.编(1981)Grune&Stratton公司出版)。

由B细胞系的细胞所表达的能识别分化阶段特异性抗原的其它抗体已得到鉴定。其中有抗CD21抗原的B2抗体；抗CD22抗原的B3抗体；抗CD10抗原的J5抗体(也称为CALLA)。见1997年1月21日授权的美国专利5,595,721号(Kaminski等)。