[发明专利]一种器官保存液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物学和医学技术领域，涉及器官移植技术中的器官保存，更具体地涉及一种器官保存液及其制备方法。

背景技术

器官移植是20世纪人类医学科学的重大进展。目前，全世界在各领域的移植总数已超过70万例(次)，存活最长的器官移植受者已近半个世纪。器官保存是器官移植的三大技术支柱之一。为了提高患者长期存活率、缓解供器官短缺的矛盾，移植临床对器官保存技术提出了更高的要求。

美国威斯康星大学(UW)Belzer教授等1988年研制成功的威斯康星大学溶液(Universityof Wisconsin Solution，UW液)极大地延长了肾、胰、肝、心脏等器官的保存时间。在UW液应用的20多年来，其已逐渐成为了临床上器官移植工作中保存液的“金标准”，后续开发成功的一系列器官保存也都以UW液为参照。Celsior液是1994年由Pasteur-Merieux研制成功的一种新型的细胞外液型保存液，其心脏冷保存效果已被实验证实优于UW液和St.Thomas液等传统的器官保存液。每升Celsior液的成分是甘露醇10.93g；组氨酸4.63g；谷胱甘肽0.92g；谷氨酸钠3.74g；乳酸钠6.90ml；KCl 1.12g；MgCl₂ 2.64g；0.1mol/L CaCl₂ 2.5ml。Celsior液对心肌的作用主要表现在：(1)细胞外Na⁺为87-115mmol/L，K⁺为6.3-6.9mmol/L，是一种高钠低钾溶液，与细胞外液相似，易于均匀扩散至组织间隙，改善灌注效果；(2)通过添加非渗透性物质甘露醇、乳糖醛酸等大分子来维持细胞内外渗透压的平衡，减轻心肌细胞水肿；(3)通过组氨酸/乳糖醛酸缓冲系统防止细胞酸化；(4)保存液中含有谷氨酸，保证充足的ATP供应；(5)用还原型谷胱甘肽作为抗氧化剂，可防止氧自由基介导的损伤作用。临床证实Celsior液在心脏移植中应用是安全有效的，可显著延长器官体外活性。但是目前此类保存液并不能降低器官移植过程中的灌注再损伤，对进一步提高器官移植后的存活率存在一定障碍。

本研究试图通过对Celsior液进行改良，研究开发出基于Celsior液的新的能防止减弱缺血再灌注损伤的多器官保存液。

四氢生物蝶呤(BH₄)为喋啶类化合物，是一氧化氮合酶(NOS)重要的辅助因子，可与NOS紧密结合，促进NO的合成与释放。内源性NO可抑制PMN对血管内皮粘附、聚集，从而减轻组织器官的缺血损伤。NO也通过抑制PMN膜结合NADPH氧化酶活性，直接中和超氧阴离子而减轻氧自由基对血管内皮的损伤。因此可将BH₄作为一种抗氧化、抗缺血再灌注损伤的因子添加至Celsior液中以加强其器官组织保护作用。

二氮嗪(diazoxide，DE)是一种苯丙噻二嗪类衍生物，作为一种血管扩张剂用于高血压危象的治疗。近年来的研究证实，DE还是一种线粒体ATP敏感性钾通道的特异性开放剂，它可模拟缺血预处理效应，对抗心肌缺血缺氧性损伤。在移植心脏保存领域，预先给予DE可显著促进心脏保存后舒张功能的恢复，缓解心肌水肿程度。因此，可将DE直接添加在心麻痹液中进行心脏保存。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种能有效防止减弱缺血再灌注损伤的多器官保存液及其制备方法。

本发明是一种器官保存液，其特征在于，在1000ml器官保存液中含有：

甘露醇    10.93g；    组氨酸  4.63g；           谷胱甘肽      0.92g；

谷氨酸钠  3.74g；     乳酸钠  6.90ml；          KCl           1.12g；

MgCl₂     2.64g；     0.1mol/L CaCl₂ 2.5ml；    四氢生物蝶呤  1.57mg；

二氮嗪    6.92mg；    余量为双蒸水。

一种上述保存液的制备方法，其特征在于：按照1000ml配置量的具体步骤如下：

(1)分别取四氢生物蝶呤1.57mg、二氮嗪6.92mg溶于1ml二甲基亚砜(DMSO)作为母液备用；配制0.1mol/L的CaCl₂ 10ml备用；