[发明专利]一种陈香茶菌种的提取及培养方法无效
申请号: | 200710029464.5 | 申请日: | 2007-07-30 |
公开(公告)号: | CN101121921A | 公开(公告)日: | 2008-02-13 |
发明(设计)人: | 罗一帆;许旋 | 申请(专利权)人: | 华南师范大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A23F3/10 |
代理公司: | 广州粤高专利代理有限公司 | 代理人: | 禹小明 |
地址: | 510631*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 陈香茶 菌种 提取 培养 方法 | ||
技术领域
本发明涉及茶叶微生物领域,具体涉及一种陈香茶菌种的提取与培养方法。
背景技术
陈香茶是广东的特色茶之一,陈香茶通常采用岭头单枞茶为原料,经前处理、发酵、循环渥堆、渥堆后处理、压饼成型、干燥等工序加工而成,其中循环渥堆是陈香茶加工中一道最关键的工序,对陈香茶品质的形成起着重要的作用。渥堆就是将经前处理后的茶叶堆放在一起,用布密封好,在一定湿度的条件堆放一段时间,让茶叶通过温度的物理作用产生生物、化学作用,从而使陈香茶的特征成分发生变化,达到滋味醇和、香气纯正、汤色黄红明亮的陈香茶品质特征。
目前陈香茶加工,一是采取在自然条件下自然陈放几年或几十年,茶叶通过慢发酵氧化而形成陈香茶,发酵速度非常慢,茶叶品质需要漫长的时间才会提高,而且还会受存放条件的温度、湿度和通风程度的影响,造成有些茶叶经长时间存放而变质。二是采取渥堆发酵,通过增加其渥堆时的温度、湿度来发酵,使茶叶快速转化为陈香茶,这种方法的发酵虽然较快,但这种只靠温度和湿度来控制茶叶氧化的方法,所得的陈香茶通常存在香味不够浓郁、滋味不够甘醇,品质不够高等缺点。
陈香茶的加工过程中,循环渥堆的作用主要是酶、微生物和湿与热等三大作用,贯穿于整个加工过程,其中微生物的作用对陈香茶的品质的影响最大,它通过生化动力(胞外酶)、物化动力(微生物热)以及微生物自身代谢的综合作用,形成了陈香茶色、香、味的品质风味,故而可利用微生物菌种加快渥堆的时序,同时又能使得制备过程中有效控制陈香茶的独特品性。渥堆自身可以产生由多种菌种组成微生物,但渥堆过程中产生的微生物的数量不多,不能起到渥堆应有的作用,甚至由于渥堆条件的变化,微生物数量变化不定,其菌种的组成比例也变化不定,造成陈香茶加工过程的品质不稳定,甚至严重影响陈香茶成品的品质、风味等。
发明内容
本发明的目的是针对现有陈香茶加工过程中存在的问题,提供一种从陈香茶渥堆过程提取和培养陈香茶菌种的方法。以备有效制备陈香茶所用。
为了实现上述发明目的,采用的技术方案如下:
一种陈香茶菌种的提取及培养方法,包括提取及培养两道工序,所述提取工序为提取茶叶原料在自然发酵过程中生长的微生物,所述培养工序采用培养基对所提取的微生物进行培养,并制作成菌种。
所述茶叶原料为以一梢驻芽中大开面二、三叶的岭头单枞茶鲜叶按绿茶制造工艺制备得绿茶,再于85~90℃加热40~50分钟,杀死残留在茶叶上的微生物。
本发明所述提取工序具体细化如下:
将经茶叶原料放入一个密封的容器中,加无菌水,使茶叶含水量为25~30%,在36~38℃下,发酵6~8天,直至茶叶表面长满微生物;
将表面长满微生物的茶叶取出,放入生理盐水中,振荡150~180分钟,让茶叶上的微生物转移到溶液中,得到陈香茶菌溶液。
所述提取工序还同时将表面长满微生物的部分茶叶取出,于90~95℃干燥60~70分钟,以供制备茶汤溶液所用。
本发明所述培养工序具体细化如下:
培养基的制备:按牛肉膏0.75~0.80g,蛋白胨1.5~2.0g,氯化钠0.75~0.80g,琼脂3.0~3.5g,茶汤溶液150~160ml,pH=7.5~7.6组成的培养基配方配制;
陈香茶菌的培养:将适量陈香茶菌溶液缓缓注入盛有培养基的平板中,摇匀,密封置于36~38℃条件下暗培养,4~5天后菌落长满整个平板,得到用于陈香茶制备的菌种。
在制备培养基时还添加重量比0.2%的磷酸二氢钾,以对培养基pH值的变化能起缓冲作用,防止菌种在保存过程中积累过多的酸。
培养工序所需的茶汤溶液的制备过程为将干燥过的茶叶30~40g,放入1000ml的沸水中,在95℃中浸泡40~50分钟,每隔10分钟振荡摇动一次,冷却后过滤,得到的滤液作为制备培养基所用。
采用上述方案制得陈香茶菌种后,为了得到纯正的菌种,还包括菌种纯化工序,所述菌种纯化工序挑取已制得的陈香茶菌种各菌落的少量菌丝体,接种在培养基平板上,菌丝体在36~38℃条件下生长7~8天后,根据长出的各菌落特点进行筛选和纯化,如此反复,直至菌落的生长状态和形态特征均表现一致时视为单一菌种的菌落。
在菌种纯化工序后,还进行接种工序,所述接种工序选择单一菌落接入培养基平板中,在36~38℃条件下培养7~8天,按此种方法进行多次纯化培养得到大量的纯化菌株。
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