[发明专利]一种陈香茶菌种的提取及培养方法

权利要求书

1.一种陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于包括提取及培养两道工序，所述提取工序为提取茶叶原料在自然发酵过程中生长的微生物，所述培养工序采用培养基对所提取的微生物进行培养，并制作成菌种。

2.根据权利要求1所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于所述茶叶原料为以一梢驻芽中大开面二、三叶的岭头单枞茶鲜叶按绿茶制造工艺制备得绿茶，再于85～90℃加热40～50分钟，杀死残留在茶叶上的微生物。

3.根据权利要求1或2所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于所述提取工序具体细化如下：

将茶叶原料放入一个密封的容器中，加无菌水，使茶叶含水量为25～30％，在36～38℃下，发酵6～8天，直至茶叶表面长满微生物；

将表面长满微生物的茶叶取出，放入生理盐水中，振荡150～180分钟，让茶叶上的微生物转移到溶液中，得到陈香茶菌溶液。

4.根据权利要求3所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于所述提取工序还同时将表面长满微生物的部分茶叶取出，于90～95℃干燥60～70分钟，以供制备茶汤溶液所用。

5.根据权利要求4所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于所述培养工序具体细化如下：

培养基的制备：按牛肉膏0.75～0.80g，蛋白胨1.5～2.0g，氯化钠0.75～0.80g，琼脂3.0～3.5g，茶汤溶液150～160ml，pH＝7.5～7.6组成的培养基配方配制；

陈香茶菌的培养：将适量陈香茶菌溶液缓缓注入盛有培养基的平板中，摇匀，密封置于36～38℃条件下暗培养，4～5天后菌落长满整个平板，得到用于陈香茶制备的菌种。

6.根据权利要求5所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于在制备培养基时还添加重量比0.2％的磷酸二氢钾，以对培养基pH值的变化能起缓冲作用，防止菌种在保存过程中积累过多的酸。

7.根据权利要求6所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于所述茶汤溶液的制备过程为将干燥过的茶叶30～40g，放入1000ml的沸水中，在95℃中浸泡40～50分钟，每隔10分钟振荡摇动一次，冷却后过滤，得到的滤液作为制备培养基所用。

8.根据权利要求7所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于还包括菌种纯化工序，所述菌种纯化工序挑取已制得的陈香茶菌种各菌落的少量菌丝体，接种在培养基平板上，菌丝体在36～38℃条件下生长7～8天后，根据长出的各菌落特点进行筛选和纯化，如此反复，直至菌落的生长状态和形态特征均表现一致时视为单一菌种的菌落。

9.根据权利要求8所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于在菌种纯化工序后，还进行接种工序，所述接种工序选择单一菌落接入培养基平板中，在36～38℃条件下培养7～8天，按此种方法进行多次纯化培养得到大量的纯化菌株。

10.根据权利要求9所述的陈香茶菌种的提取及培养方法，其特征在于在接种工序后，还进行菌种保存工序，所述菌种保存工序将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移入4℃～5℃的低温下保藏，每隔2～3个月转一次。