[发明专利]模拟移动床色谱法从淮山药中分离纯化黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物的分离提纯方法，具体涉及模拟移动床色谱法从淮山药中分离纯化黄酮的方法。

背景技术

淮山药为薯蓣科多年生缠绕草质藤本，现代医学研究表明，淮山药中含有黄酮类，还有皂苷、粘液质、胆碱、淀粉、糖、蛋白质、鞣质、多种氨基酸、维生素C等，其内部成分比较复杂，目前提取淮山药黄酮的方法是浸泡、过滤、萃取得到粗产品，但是要达到药用要求必须进一步纯化，目前常用的纯化方法是以中性氧化铝作为填料的柱层析法。柱层析是药物与食品工业中常用的精制手段，设备简单成本低，但是这种方法虽然可以进行大规模制备，但是分离的效率低，流动相浪费严重，固定相利用效率低，产量低，成本高，特别是样品成分比较复杂的物质，柱层析更不适合分离。

70年代以来，美国UOP公司开发了模拟移动床(SMB)原理的色谱技术，该技术使吸附剂颗粒装填后不在移动，由原料进出口和产品液流进出口不断切换的方法，形成吸附剂颗粒和液流相对逆流运动来模拟固定相的移动。近年来利用模拟移动床色谱分离药物技术得到了快速的发展。美国的一些专利文献报道了模拟移动床色谱分离手性药物如光学异构体、外消旋物质和对映体以及石油化学品的分离。其中US5,518,625专利涉及了心得安、氨酰心安和3-氯-苯-1-丙醇的手性分离。日本Daicel化学工业公司也开发了使用模拟移动床色谱分离手性异构体的方法。但是，对于使用模拟移动床色谱分离提纯淮山药黄酮的方法仍未见公开报道。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种模拟移动床色谱法从淮山药中分离纯化黄酮的方法，工业化连续生产，提高产品的纯度和收率，降低生产成本。

本发明的目的的实现包括以下步骤：

a、取10-24kg的88％乙醇超声提取0.5-1.2kg淮山药中的黄酮；

b、按乙醇和己烷的体积比为4∶6加入己烷，在常温下进行液液萃取3-5小时，过滤，滤液减压蒸干得到淮山药黄酮粗提物；

c、将淮山药黄酮粗提物制成进料液到模拟移动床纯化；淮山药黄酮粗提物甲醇溶解，0.45μm有机系滤膜过滤，得浓度100-300mg/ml的模拟移动床的进料液；洗脱液为甲醇与水的混合物，甲醇与水的体积比为4∶6；

d、将模拟移动床的萃取液用乙醇溶解，每克萃取液30-40mL乙醇溶解，超声使其完全溶解，然后加入水静止20分钟后逐渐降温至零下5-零下12℃，结晶6-9小时，过滤，水洗晶体，结晶两次，沉淀真空烘干得淮山药黄酮纯品。

本发明方法中的模拟移动床色谱(SMBC)分离系统由洗脱泵、进样泵、萃取泵、色谱柱、电磁阀、信号采集器、系统控制器和计算机连接组成，进样泵流量12-30ml/min，压力3-10Mpa；洗脱泵流量250-600ml/min，压力3-10Mpa；萃取泵流量250-400ml/min，压力3-10Mpa；移动床工作温度15-25℃；色谱柱填料为ODS-2，填料粒度为10μm。

本发明方法中的模拟移动床有4-16支色谱柱组成，经电磁阀切换改变进料口、出料口位置，色谱柱分4个区域，每一区由1-4支串联组成；进样液流速为12-30ml/min，洗脱液流速为250-600ml/min，萃取液流速为250-400ml/min，提余液流速为150-250ml/min，阀切换时间为18-24min。

本发明方法与目前精提淮山药黄酮的柱层析法比较收率高，生产每千克淮山药黄酮产品可节省溶剂18050L，节省填料700.6Kg，产品纯度达到95％以上，模拟移动床连续化生产，柱层析方法是间歇的，模拟移动床色谱的引入提高了生产的自动化水平，工作效率、生产环境得到极大的改善。

具体实施方式

实例1：依以下步骤在江苏汉邦科技有限公司的模拟移动床上分离纯化淮山药黄酮：

a、取10kg的88％乙醇超声提0.5kg取淮山药中的黄酮；

b、按乙醇和己烷的体积比为4∶6加入己烷，在常温下进行液液萃取3小时，过滤，滤液减压蒸干得到淮山药黄酮粗提物；

c、将淮山药黄酮粗提物制成进料液到模拟移动床纯化；甲醇溶解淮山药黄酮粗提物，0.45μm有机泵滤膜过滤，得浓度100mg/ml的模拟移动床进料液；洗脱液为甲醇与水的混合物甲醇与水体积比为4∶6；