[发明专利]用酶工程技术生物合成谷胱甘肽的方法无效
| 申请号： | 200710020902.1 | 申请日： | 2007-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN101054560A | 公开（公告）日： | 2007-10-17 |
| 发明（设计）人： | 吴梧桐;劳兴珍;郑珩;李薇 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | C12N1/16 | 分类号： | C12N1/16;C12P21/02;C12N11/04;C07K1/18 |
| 代理公司： | 南京苏科专利代理有限责任公司 | 代理人： | 孙立冰 |
| 地址： | 210009*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 工程技术 生物 合成 谷胱甘肽 方法 | ||
【权利要求书】：
1、一种含有谷胱甘肽合成酶的菌株，保藏号是：CGMCC No.1917。
2、权利要求1的菌株用于制备谷胱甘肽的用途。
3、一种生物合成谷胱甘肽的方法，包括：将权利要求1的菌株用海藻酸钠包埋法制备固定化细胞；固定化细胞在含有0.1～1％胆酸钠的底物溶液中进行活化、转化、分离。
4、权利要求3的方法，其中海藻酸钠包埋法包括：筛选菌株经培养2～3天，收集湿菌体细胞悬浮于生理盐水中，另取海藻酸钠溶于生理盐水中，加热溶解，将两者按1∶1～2∶1的比例混合搅拌均匀，以5～12号针头将混合物挤入0.1～1mol/L氯化钙溶液中，同时缓慢搅拌使成形，4℃静置4～24小时，用生理盐水洗涤。
5、权利要求3的方法，其中反应底物含：L-谷氨酸0.01～0.1mol/L、L-半胱氨酸0.01～0.1mol/L、L-甘氨酸0.01～0.1mol/L、葡萄糖1～10％、氯化镁0.01～0.2mol/L、pH8.0的Tris缓冲液0.1mol/L。
6、权利要求3的方法，其中转化包括：将活化的固定化细胞装柱，在37℃下恒温水循环，形成连续柱反应器，将底物溶液逆行通过连续反应器，使底物转化成产物谷胱甘肽。
7、权利要求3的方法，其中分离时先后用732阳离子交换树脂和707阴离子交换树脂进行分离纯化。
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