[发明专利]利用重组酶/转座酶的改进的DNA免疫法

权利要求书

1.如SEQ ID NO：1所示的兔GMCSF多肽。

2.一种嵌合分子，其包含与异源氨基酸序列融合的权利要求1的多肽。

3.权利要求2的嵌合分子，其中所述异源氨基酸序列是表位序列。

4.权利要求2的嵌合分子，其中所述异源氨基酸序列是免疫球蛋白序列。

5.权利要求4的嵌合分子，其中所述的免疫球蛋白序列是免疫球蛋白的Fc区域。

6.一种核苷酸序列，其包含编码权利要求1的兔GMCSF多肽的核苷酸序列。

7.一种载体或表达盒，其包含权利要求6的核苷酸序列。

8.一种分离的宿主细胞，其由权利要求6的核酸转化。

9.一种免疫或接种动物的方法，所述方法包括：

(i)施用至少一种DNA构建体，其包含至少一种编码抗原的表达盒和第一重组位点；

(ii)通过向所述动物施用至少一种佐剂刺激所述动物的免疫系统；以及，

(iii)施用重组酶，所述重组酶介导所述表达盒整合到包含第二重组位点的所述动物的基因组中，所述抗原在其中表达。

10.权利要求9的方法，其中所述佐剂作为多肽导入。

11.权利要求9的方法，其中所述佐剂的施用包括向所述动物中导入：(i)作为DNA构建体的所述佐剂，该DNA构建体包含编码所述佐剂的表达盒以及第一重组位点；以及，(ii)重组酶，其介导所述表达盒整合到包含第二重组位点的所述动物的基因组中，所述抗原在其中表达。

12.权利要求9的方法，其中所述抗原选自病毒抗原、细菌抗原、真菌抗原、原生动物抗原以及与疾病如感染、炎症、癌症、哮喘/变态反应、自身免疫疾病、多发性硬化、脓毒症/中毒性休克、类风湿关节炎、同种异体移植物排斥、银屑病等相关的抗原。

13.权利要求9的方法，其中所述抗原是CD20。

14.权利要求11的方法，其中所述佐剂选自GMCSF、Flt3L、白细胞介素如IL-1α和β，IL-2，IL-12，IL-15，IL-18，IL-4，IL-5，IL-6，IL-10，TNF-α，TNF-β.，IFN-γ等以及共刺激分子如TCA3、CD80(B7.1)、CD86(B7.2)、CD40配体(CD154)、MCP-1、MIP-1α，β、RANTES等。

15.权利要求11的方法，其中所述佐剂是SEQ ID NO：1的兔GMCSF。

16.权利要求11的方法，其中所述编码抗原的表达盒和所述编码佐剂的表达盒是一个DNA构建体的部分。

17.权利要求11的方法，其中所述编码抗原的表达盒和所述编码佐剂的表达盒在不同的DNA构建体上。

18.权利要求9或11的方法，其中所述重组酶作为多肽施用。

19.权利要求9或11的方法，其中所述重组酶作为编码所述重组酶的信使RNA分子施用。

20.权利要求9或11的方法，其中所述重组酶作为包含编码所述重组酶的表达盒的DNA构建体施用。

21.权利要求9或11的方法，其中所述重组酶是由噬菌体表达的位点特异性重组酶。

22.权利要求21的方法，其中所述重组酶选自φC31、噬菌体R4和TP901-1。

23.权利要求21的方法，其中所述位点特异性重组酶选自Cre重组酶、Cre样重组酶、Flp重组酶和R重组酶。

24.权利要求9或11的方法，其中所述重组酶是转座酶或逆转录转座酶。

25.权利要求24的方法，其中所述转座酶选自AC7、Tn5、Tn916、Tn951、Tn1721、Tn2410、Tn1681、Tn1、Tn2、Tn3、Tn4、Tn5、Tn6、Tn9、Tn10、Tn30、Tn101、Tn903、Tn501、Tn1000、Tn1681、tn2901、AC转座子、Mp转座子、Spm转座子、En转座子、Dotted转座子、Mu转座子、Ds转座子、En转座子和I转座子。