[发明专利]基于PCR检测谷丝核菌

权利要求书

1.一种分离的DNA分子，其包括选自下组的内部转录间隔区(ITS)序列：

(a)谷丝核菌的ITS1，其中谷丝核菌的ITS1包括：SEQ ID NO：17的核苷酸31-243，SEQ ID NO：18的核苷酸31-242，SEQ ID NO：19的核苷酸31-243，SEQ ID NO：20的核苷酸31-241，SEQ ID NO：21的核苷酸31-243，SEQ ID NO：22的核苷酸31-243，SEQ ID NO：243的核苷酸31-180，SEQ ID NO：24的核苷酸31-240，SEQ ID NO：25的核苷酸31-242，或SEQ ID NO：26的核苷酸31-242；

(b)谷丝核菌的ITS2，其中谷丝核菌的ITS2包括：SEQ ID NO：17的核苷酸397-630，SEQ ID NO：18的核苷酸396-629，SEQ ID NO：19的核苷酸397-630，SEQ ID NO：20的核苷酸395-628，SEQ ID NO：21的核苷酸397-630，SEQ ID NO：22的核苷酸397-630，SEQ ID NO：23的核苷酸397-630，SEQ ID NO：24的核苷酸394-627，SEQ ID NO：25的核苷酸396-629，或SEQ ID NO：26的核苷酸396-629。

2.一种在基于扩增的真菌内部转录间隔区DNA序列的检测中可使用的寡核苷酸引物，其中所述引物与权利要求1的内部转录间隔区序列的至少10个连续核苷酸序列相同。

3.一对在基于扩增的真菌内部转录间隔区DNA序列的检测中可使用的寡核苷酸引物，其中至少所述引物之一是权利要求2的寡核苷酸引物。

4.一种选自SEQ ID NO：7-16的寡核苷酸引物。

5.一对寡核苷酸引物，其中至少所述引物之一是权利要求4的寡核苷酸引物。

6.根据权利要求5所述的一对寡核苷酸引物，其中所述引物对选自下列引物对：

SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：9，

SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：10，

SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：9，

SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：14，

SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：4，

SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：9，

SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：9，

SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：9，

SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：4，

SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：4，

SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：10，和

SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：10

7.根据权利要求6所述的一对寡核苷酸引物，其中所述引物对是SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：9。

8.一种检测真菌病原体的方法，包括步骤：

(a)从感染病原体的植物叶片中分离DNA；

(b)用所述DNA进行聚合酶链式反应扩增，其中使用根据权利要求2所述的至少一种引物；和

(c)通过显示所述聚合酶链式反应扩增的产物来检测所述真菌病原体。

9.权利要求8的方法，其中所述真菌病原体是谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)。

10.一种检测真菌病原体的方法，包括步骤：

(a)从感染病原体的植物叶片中分离DNA；

(b)以所述DNA为模板，使用根据权利要求3所述的一对引物，进行聚合酶链式反应，扩增所述病原体的内部转录间隔区序列的一部分；

(c)通过显示该内部转录间隔区序列的已扩增部分来检测所述真菌病原体。

11.权利要求10的方法，其中所述真菌病原体是谷丝核菌。