[发明专利]新型嗜酸耐热海藻糖基合成酶及其制备和用途

权利要求书

1.一种新型嗜酸耐热海藻糖基合成酶，所述酶能在pH5.5，75℃条件下不需海藻糖为底物，而利用还原性淀粉部分水解物，高效合成具有海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖，并具有下列物理化学特性：

(1)  作用：

不需海藻糖为底物，而利用还原性淀粉部分水解物，特异性高效合成具有海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖。其中的还原性淀粉部分水解物，来自淀粉的部分水解，由三个或三个以上葡萄糖残基组成。

(2)  分子量

在十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)上约75,000到85,000道尔顿；

(3)  等电点(PI)

在用两性电解质的等电点电泳上约6.2到7.2；

(4)  最佳温度

在pH5.5保存30分钟时，60～80℃；

(5)  最佳pH

在65℃保存30分钟时，5.0～6.0；

(6)  热稳定性

在pH5.5保存60分钟时，可稳定的温度为约30～75℃；

(7)  pH稳定性

在25℃保存60分钟时，可稳定的pH为4.0～11.0。

2.根据权利要求1的酶，它是一种来自微生物的酶。

3.根据权利要求1的酶，其中所述微生物是埃希氏菌属大肠杆菌(EscherichiaColi)MTS-16，保藏号为CGMCC No 0600或酵母菌(Saccharomyces sp)MTH-8保藏号为CGMCC No 0525。

4.一种制备权利要求1的酶的方法，所述方法含有在营养培养基中培养能生产所述酶的微生物以形成所述的酶，并回收所得的酶；所述微生物为选自埃希氏菌属、酵母菌的微生物。

5.一种制备具有海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖的方法，包括：

(a)使权利要求1的酶作用于还原性淀粉部分水解物，高效合成具有海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖。其中的还原性淀粉部分水解物，来自淀粉的部分水解，由三个或三个以上葡萄糖残基组成。

(b)纯化所得的非还原性淀粉糖。其中包括使步骤(a)中所得的非还原性淀粉糖溶液经装有强酸阳离子交换树脂的柱进行柱层析以纯化该非还原性淀粉糖的步骤。

6.一种制备含海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖的多糖组合物的方法，包括：

(a)使权利要求1的酶作用于还原性淀粉部分水解物，高效合成具有海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖。

(b)回收所得的带有或不带有其它多糖的具有海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖。

(c)将带有或不带有其它多糖的具有海藻糖结构作为末端单元的非还原性淀粉糖掺入物质构成组合物。

7.根据权利要求6的方法，其中所述的组合物是食品或化妆品或药物。

8.一种制备海藻糖的方法，包拈：(a)使权利要求1的酶与一种海藻糖基水解酶一起作用于还原性淀粉部分水解物以形成海藻糖溶液。其中的海藻糖基水解酶能特异性水解根据权利要求5的方法产生的非还原性淀粉糖中海藻糖部分和其余糖基部分之间的键，形成海藻糖。其中该步骤中还包括使淀粉脱支酶作用于还原性淀粉部分水解物，使葡萄糖淀粉酶作用于所得海藻糖溶液的步骤。

(b)纯化所得的海藻糖。其中还包括将步骤(a)中所得的海藻糖溶液经装有强酸阳离子交换树脂的柱进行柱层析以纯化海藻糖并制成含水或无水的结晶海藻糖的步骤。

9.一种制备含海藻糖的多糖组合物的方法，包括：

(a)使权利要求1中的酶与一种海藻糖基水解酶一起作用于还原性淀粉部分水解物以形成海藻糖。

(b)回收所得的带有或不带有其它多糖的海藻糖。

(c)将带有或不带有其它多糖的海藻糖糖掺入物质构成组合物。

10.根据权利要求8的方法，其中所述的组合物是食品或化妆品或药物。