[发明专利]新型速激肽、其前体肽及其编码基因

说明书

技术领域

本发明涉及具有脊椎动物肠道收缩活性的新型速激肽及其前体肽，具体地说，涉及得自真蛸(章鱼，Octopus vulgaris)的后部唾液腺、具有脊椎动物肠道收缩活性的新型速激肽、其前体肽及其编码基因。

背景技术

章鱼唾腺精(eledoisin)是从海洋ジヤコウダコ(Eledone moschata和E.aldrovandi)后部唾液腺的丙酮提取物中分离的，显示出对狗具有强降压作用，章鱼唾腺精是由11个氨基酸残基构成的生理活性神经肽(Erspamer，V.等，Experientia，18，58，1962)。这种章鱼唾腺精除了具有降压作用外，还具有使豚鼠回肠收缩的作用。此外，在静脉注射的情况下，明显具有促进狗唾液分泌的特殊作用。

此后，从青蛙皮肤中分离出具有同样作用的肽，将其命名为泡蛙肽(Erspamer，V.等，Experientia，20，489，1964)。

由于这些肽具有使豚鼠回肠迅速收缩的作用，故与缓激肽(brady(缓慢地)kinin(动作的物质))相对，将这些肽命名为速激肽(tachy(＝快速)kinin，使快速收缩的物质)。此外，根据这些肽的结构，P物质的结构也清楚了。

被分类为速激肽的肽随后相继从两栖类(Yasuhara，T.等，Biomed.Res.，2，613，1981)和鸟类(Conlon，J.M.等，Regulatory Peptides，20，171，1988)等的脊椎动物中分离出来，但从无脊椎动物中分离出来的除章鱼唾腺精以外，仅从传播黄热病的蚊子中发现唾液激肽(sialokinin)(Champagne，D.E.&Ribeiro，J.M.：Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91，138，1994)。

目前，速激肽是对在肽的C末端具有下式所示通常的氨基酸序列：

-Phe-Yaa-Gly-Leu-Met-NH₂(式中，Yaa是芳族氨基酸(Phe、Tyr)、支链氨基酸(Val、Ile))、表现出肠道收缩作用、降压作用、促进唾液分泌作用等的生理活性肽的总称。在这样的速激肽中除了上述的P物质、章鱼唾腺精、泡蛙肽外，还包括神经激肽A、神经激肽B、肛褶蛙肽等(生物学辞典(第4版)，岩波书店，1997)。

这样，期望可将速激肽用作新药开发的基础化合物，特别是，由于认为P物质作为初级感觉神经的递质，与疼痛的传递有关，因此预期可将其开发作为镇痛药，并且一直在对此进行研究。此外，预期也可将其用作试剂，以阐明高等动物神经系统中的信息处理机构。

然而，真蛸的后部唾液腺除含有上述章鱼唾腺精外，还含有具有使甲壳类动物麻痹的效应的糖蛋白、章鱼毒素(cephalotoxin)、已知为河豚毒的河豚毒素等有毒物质，因此称为毒腺。此外，已知有含有章鱼胺、5-羟色胺、酪胺、去甲肾上腺素、组胺、乙酰胆碱等生物必需胺类以及蛋白水解酶、透明质酸酶等酶类的物质(Boucaud-Camou，E.&Boucher-Rodoni，R.1983.Feeding and digestion in Cephalopods.载于“The mollusca”，(Saleuddin，A.S.M.&Wilbur，K.M.)，Academic pressand New York.)。可是，没有关于发现除章鱼唾腺精以外的速激肽的报道。此外，虽然已知章鱼唾腺精具有使哺乳动物平滑肌收缩、血管扩张和降压的作用，但是关于章鱼唾腺精对真蛸的作用却几乎一无所知。

因此，需要从更多的动物物种中发现速激肽，以了解速激肽对各种动物物种的作用以及物种特异性，通过结构-活性相关性研究等阐明高等动物神经系统中的信息处理机构以及获取可用于药品开发的信息。

因而，本发明的课题是发现新的速激肽、了解其结构、阐明其生理活性、提供能够用作试剂以阐明高等动物神经系统的信息处理机构、或者用作研制农药或者药品的基础化合物。

此外，本发明的课题还在于弄明白这些速激肽的前体肽以及编码这些速激肽的基因，提供所述速激肽的制备方法。

发明的公开

为了解决上述课题，本发明提供具有以下特性的速激肽：

(1)氨基酸残基数为12个；

(2)N末端是Lys；

(3)C末端的5个氨基酸由下面的氨基酸序列(I)表示，

   -Phe-Xaa-Gly-Leu-Met-NH₂                (I)(式中，Xaa表示Val、Ile、Phe或Tyr)。