本申请提供一种组合物,其包含重组DNA聚合酶与3’‑酯化核苷酸类似物。所述重组DNA聚合酶的氨基酸序列与9°N DNA聚合酶(SEQ ID NO:1)有至少90%的同源性,且所述重组DNA聚合酶包含在对应于9°NDNA聚合酶氨基酸残基141与143位置的至少二个突变。本申请还提供一种重组DNA聚合酶。所述重组DNA聚合酶的氨基酸序列与9°N‑IIIDNA聚合酶(SEQ ID NO:3)有至少90%的同源性,且该重组DNA聚合酶包含在对应于9°N‑III DNA聚合酶氨基酸残基480与486位置一个或二个突变