一种鉴别布鲁氏菌猪种S2疫苗株与其他种属野毒株的PCR试剂盒及其使用方法，属于检测领域。该试剂盒包括PCR缓冲液、DNA聚合酶、灭菌双蒸水、野毒株质控标准品和疫苗株质控标准品组成，其中包括用于鉴定猪种1型菌株的特异性引物对seq ID No.1和seq ID No.2，以及S2疫苗株和野毒株的特异性引物对该PCR试剂盒实用性强，成本低，耗时短，可重复性好，通过普通PCR扩增后，利用电泳检测扩增条带的大小，能够快速、有效、直观的鉴别样品中布鲁氏菌猪种S2疫苗株和其他种属野毒株，用于解决布鲁氏菌和防控过程中疫苗株和野毒株鉴别诊断的难题
本发明提供一种区别禽坦布苏病毒弱毒疫苗株和野毒株的PCR‑RFLP方法，本发明的方法仅需上游引物F和下游引物R（SEQ ID NO.1‑2所示），并仅需常规限制性内切酶Hind III进行RFLP酶切后进行鉴别，无需复杂繁琐的条件优化过程，本发明在禽坦布苏病毒野毒株和鸭坦布苏病毒弱毒疫苗株快速鉴别诊断检测上快捷准确，解决目前尚未能解决的区别商品化弱毒疫苗毒与野毒株的难题，可以对我国广泛使用疫苗株WF100的养殖场进行禽坦布苏病毒检测与疾病的诊断以及实验研究中这些病毒株的相互鉴别
本发明提供一种联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的引物和探针、试剂盒及应用，引物和探针包括：检测非洲猪瘟病毒的正向引物，其序列如SEQ ID NO:1所示；检测非洲猪瘟病毒的反向引物，其序列如SEQID NO:2所示；检测非洲猪瘟病毒的TaqMan探针，其序列如SEQ ID NO:3所示；检测猪伪狂犬病病毒野毒株的正向引物，其序列如SEQ ID NO:4所示，检测猪伪狂犬病病毒野毒株的反向引物，其序列如SEQ ID NO:5所示，检测检测猪伪狂犬病病毒野毒株的TaqMan探针，其序列如SEQ ID NO:6所示。本发明的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的引物和探针、试剂盒及应用，可同时检测非洲猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒野毒株的单一或混合感染，提高种猪场ASF和PR监测和诊断效率。
本发明公开了一种用于检测非洲猪瘟病毒野毒株和疫苗株的试剂盒。本发明提供了用于检测ASFV野毒株和/或疫苗株的单链DNA组，由引物对1（SEQ ID No.1和SEQ ID No.2）和探针1（SEQ ID No.3）、引物对2（SEQ ID No.4和SEQ ID本发明建立的多重荧光定量PCR法可有效区分ASFV野毒感染和基因缺失的疫苗毒株，该方法具良好特异性、敏感性和重复性，为ASFV野毒和疫苗毒的鉴别诊断提供了技术支撑；具良好的社会应用前景。
本发明提供了一种可区分布鲁氏菌A19疫苗株与国内流行野毒株的分子标记，以及检测该标记的的荧光定量PCR引物、探针及检测方法。所提供的分子标记，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明还提供一种用于区分布鲁氏菌A19疫苗与国内流行野毒株的引物对，用于扩增在中国流行的布鲁氏菌野毒株的特异性核酸片段。本发明提供一种可区分布鲁氏菌A19疫苗和国内流行野毒株的引物、探针及检测方法，对我国布病防控具有重要的现实意义。
本发明涉及分子标记技术领域，具体涉及鉴别布鲁氏菌疫苗株S2和野毒株的SNP分子标记及其应用。本发明提供用于鉴别布鲁氏菌疫苗株S2和野毒株的SNP分子标记，其包含位于如SEQ ID NO.1所示序列第749位多态性为G/T的核苷酸序列，该SNP分子标记的多态性位点为G，对应于布鲁氏菌疫苗株S2，多态性位点为T，对应于野毒株。本发明的SNP分子标记及其检测引物和探针可实现布鲁氏菌疫苗株S2和野毒株的简便和高效鉴别，准确性较高，可应用于布鲁氏菌病病原监测和流行病学分析，为布鲁氏菌病防控提供高效的技术支撑。
ID NO：1‑6所示的FIP、BIP、F3、B3、LoopF和LoopB组成的引物组以及如SEQ ID NO：7‑8所示的荧光探针probe和淬灭探针Quencher，该引物组能够对猪流行性腹泻病毒野毒株、疫苗株均进行扩增，对于野毒株的ORF3基因保守区域开发出荧光引物，用于进行荧光的特征性反应，实现了对猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的高特异性、敏感性的快速定量检测。同时，本发明还提供了一种试剂盒、检测猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的方法。
