本发明公开了一种蓝氏贾第虫LAMP快速检测方法,属于生物技术领域。一种蓝氏贾第虫LAMP快速检测方法,包括以下步骤:根据NCBI中已有的蓝氏贾第虫序列,通过序列比对,多次试验的方法,筛选到可以用于蓝氏贾贾第虫LAMP的序列并设计LAMP引物;以蓝氏贾第虫、隐孢子虫、阿米巴原虫、芽囊原虫和弓形虫阳性样品基因组DNA作为模板进行引物的特异性试验,以超纯水为阴性对照,向反应管中加入1μL 1000×SYBR Green I,在自然光下用肉眼观察,同时用巢氏PCR进行验证;将蓝氏贾第虫阳性样本的总DNA进行倍比稀释后作为模板,分别用优化后的LAMP反应体系和巢氏PCR进行检测,进行引物的敏感性试验;采集新鲜犊牛粪便样本,提取DNA,分别用优化后的LAMP反应体系和巢氏PCR进行比较。
本发明公开了一种用于检测蓝氏贾第鞭毛虫核酸的引物、荧光探针和试剂盒,属于生物检测技术领域。所述用于检测蓝氏贾第鞭毛虫核酸的引物和荧光探针,引物包括正向引物和反向引物,正向引物如序列表中SEQ ID NO.1;反向引物如序列表中SEQ ID NO.2;所述荧光探针如序列表中SEQ ID NO.3所述用于检测蓝氏贾第鞭毛虫核酸的试剂盒包括上述引物和荧光探针。
本发明公开了一种用环介导恒温扩增技术检测贾第虫DNA的引物组,包括外部引物对(F3、B3)和内部引物对(FIP、BIP),其中,F3具有SEQ ID No:1所示的序列,B3具有SEQ ID No:2所示的序列本发明还公开了用上述引物组进行环介导恒温扩增反应,检测蓝氏贾第鞭毛虫(以下简称贾第虫)DNA的方法、检测用试剂盒以及上述引物组在制备贾第虫DNA检测剂中的应用。该检测方法通过设计4条贾第虫特异引物,实现了贾第虫DNA的LAMP快速检测,从而提高了贾第虫病的临床诊断速度和准确率。