本发明属于酶工程技术领域,涉及一种青霉素G酰化酶突变体及其应用。所述的青霉素G酰化酶突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中突变多个氨基酸位点。利用本发明的青霉素G酰化酶突变体,催化水解7‑苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸(G‑7‑ADCA)制备7‑氨基‑3‑脱乙酰氧基头孢烷酸(7‑ADCA),与突变之前的酶相比,具有更高比活力,更高的转化效率,更低的底物残留和更好的有机溶剂耐受性
本发明公开了一种GDSL家族脱乙酰化酯酶突变体Est8‑G45R及其应用,所述酯酶突变体Est8‑G45R氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该酯酶突变体Est8‑G45R和野生酯酶Est8相比,对功能底物7‑氨基头孢烷酸的脱乙酰化活性从2.6U/mg提高到8.53U/mg。本发明在医药领域中对合成新型头孢菌素类抗生素中间体脱乙酰化7‑氨基头孢烷酸具有良好的应用前景。