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[发明专利]利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用-CN202210643367.X有效
发明人：董维亮;刘婧媛;王彤;周小力;周杰 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2022-06-09 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明涉及利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用，取待成膜菌株和粘细菌分别培养后，离心制成菌悬液；将待成膜菌株和粘细菌的菌悬液共同转接至成膜培养基培养，形成菌膜；所述成膜培养基为CYE培养基、CYE稀释培养基或MSM培养基；所述CYE稀释培养基为稀释50倍的CYE培养基。发明固定化菌膜采用了一种通过结合黏细菌建立生物粘附膜结构提高外源微生物菌群的降解效率和环境稳定性的新策略。降解菌群经过生物粘附成膜后，其对环境变化的耐受性显著提高，尤其是对酸性条件和高底物浓度环境的鲁棒性更强。生物膜结构为降解体系提供的保护，有助于建立多种微生物的共存关系，并起到保护和维稳结构的作用。
利用细菌构建生物粘附固定化菌膜方法及其应用

[发明专利]一种改善酶制剂性能的复合型载体及其应用-CN202310306102.5在审
发明人：徐丽;程瑛;苏丹;陈雪姣;程超;邓晓旭;詹羿扬;王启军;辜玲芳;张成杰;王晓亮 -专利权人：武汉新华扬生物股份有限公司;菏泽海鼎饲料科技有限公司
申请日： 2023-03-27 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明属于酶制剂技术领域，具体提供了一种改善酶制剂性能的复合型载体，以质量百分比计，包括：5.2‑5.5％的酵母菌菌粉，0.05‑0.1％的乙酸钠，1％琥珀酸，1％的氯化钙，0‑10％的增稠剂，余量为水。本发明提供的这种改善酶制剂性能的复合型载体所用原料均为饲料添加剂目录中允许在饲料中添加的产品，保证了产品的合规性和安全性。可以大大减少高温、酸性条件下酶制剂中酶活力损失，保持酶活性的相对稳定。本发明还提供了一种改善酶制剂性能的方法，能够大幅提高酶制剂的耐酸留存率和耐温留存率，且使用方法简单，有效提高了酶制剂在动物饲料中的应用前景。
一种改善酶制剂性能复合型载体及其应用

[发明专利]一种固定化酶法制备谷胱甘肽的方法和应用-CN202210883616.2在审
发明人：陈晖;肖明华;刘秀继;姚骏;李志军;方荣 -专利权人：安琪酵母股份有限公司
申请日： 2022-07-26 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明具体涉及一种固定化酶法制备谷胱甘肽的方法和应用。本发明提供的谷胱甘肽的制备方法包含，以酿酒酵母单倍体子囊孢子为固定酶催化剂催化底物反应合成谷胱甘肽，以磷酸烯醇式丙酮酸ATP原位再生反应体系为供能系统，所述酿酒酵母单倍体子囊孢子被敲除或失活细胞壁β‑葡聚糖合成基因中的一种或两种以上的组合，且GSH1基因、GSH2基因和PYK1基因共表达。本发明以同时产GSH1、GSH2和丙酮酸激酶的酿酒酵母单倍体子囊孢子为固定酶催化剂催化合成谷胱甘肽，不再需要外源添加三种酶，大幅降低原料成本，得到的产物易纯化，制备得到的谷胱甘肽纯度高。
一种固定法制谷胱甘肽方法应用

[发明专利]一种利用菌丝球固定重组毕赤酵母并实时观察荧光的方法-CN202211522787.9在审
发明人：张建国;郑潇;丛文杰 -专利权人：上海理工大学
申请日： 2022-11-30 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用菌丝球固定重组毕赤酵母并实时观察荧光的方法，其中主要包括以下步骤：取黑曲霉孢子液接种于PDA培养基中形成黑曲霉菌丝球，构建重组毕赤酵母，用制备好的菌丝球固定重组毕赤酵母，再将吸附了重组毕赤酵母的菌丝球置于凹形载玻片中培养，并利用荧光显微镜对绿色荧光进行观察等五个步骤。本发明通过黑曲霉菌丝球的菌丝对重组毕赤酵母进行吸附，并使用流动的培养基进行培养，一方面菌丝球的菌丝吸附不会对重组毕赤酵母有任何损害，可以使重组毕赤酵母更好的生长；另一方面可以完整地观察重组酵母的生长情况和绿色荧光蛋白的表达情况，有利于绿色荧光的观察。
一种利用菌丝固定重组酵母实时观察荧光方法

[发明专利]一种平菇-反硝化光合菌-小球藻共生体系的制备方法及其应用-CN202211439426.8在审
发明人：亓正良;刘新利;樊祥瑞;李振;杨飞越;王熙琳 -专利权人：齐鲁工业大学
申请日： 2022-11-17 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明属于水产养殖领域，具体涉及一种平菇‑反硝化光合菌‑小球藻共生体系的制备方法及其应用。通过步骤实现：首先培养反硝化光和细菌培养液、菌丝球培养液基小球藻培养液，然后构建平菇‑反硝化光合菌‑小球藻共生体系，构建完成后，收集平菇‑反硝化光合菌‑小球藻共生体系即可。本发明提供了一种平菇‑反硝化光合菌‑小球藻共生体系强化水产养殖尾水处理的方法，处理时间缩短，效率提高，改善直投菌剂处理结束后功能菌群流失的问题。
一种硝化光合小球藻共生体系制备方法及其应用

[发明专利]一种以丝状真菌为载体强化反硝化细菌脱氮的方法-CN201810533296.1有效
发明人：缪恒锋;周梦娟;阮文权 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-05-29 - 公布日： 2021-05-28 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种以丝状真菌为载体强化反硝化细菌脱氮的方法，属于污水生物处理技术领域。本发明方法包括：接种适量的泥水混合液于反硝化富集培养液中培养，得到反硝化细菌的菌悬液；接种Talaromyces flavus S1斜面培养基接种于PDB培养基中，摇床培养获得成熟的菌丝球；将反硝化细菌菌悬液接种到含有成熟菌丝球的反硝化培养液中，以强化反硝化细菌的脱氮效果，且重复收集菌丝球。本发明方法中使用的Talaromyces flavus S1菌丝球，比目前已有的Trichodermavirid菌丝球固定化反硝化细菌的脱氮效果好，其不仅具有操作简单、沉降性能好和重复利用率高等优点，还强化反硝化细菌的脱氮效果，对今后反硝化细菌的实际应用提供依据，还开拓了Talaromyces flavus S1的实际应用前景。
一种丝状真菌载体强化硝化细菌方法

[发明专利]人工纤维小体、利用其分解纤维素及生产酒精的方法-CN201710998031.4有效
发明人：朱一民;魏毓宏;蔡伸隆 -专利权人：朱一民;长春人造树脂厂股份有限公司;长春石油化学股份有限公司
申请日： 2017-10-24 - 公布日： 2021-04-16 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明提供一种纤维素的分解方法，包含：建立重组噬菌体，其是通过修改噬菌体的基因组，使该噬菌体的表面表达：与分解酶具有亲和性的接合肽，及与细胞的表面的锚定位具有亲和性的锚定肽；使分解酶接触重组噬菌体；以及使纤维素接触该分解酶。
人工纤维小体利用分解纤维素生产酒精方法

[发明专利]一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法-CN201710464992.7有效
发明人：杨革;刘胜格;巩志金;车程川;刘金锋 -专利权人：曲阜师范大学
申请日： 2017-06-19 - 公布日： 2020-11-24 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种以绿色木霉为载体进行反硝化细菌固定化的方法，是由以下步骤获得的：副球菌接种至富集培养基，摇床培养，将所得菌体悬浮于无菌生理盐水中，得反硝化细菌菌悬液；绿色木霉接种至固体培养基上培养，无菌水洗涤，低温保存，得孢子悬浮液；将反硝化细菌菌悬液和孢子悬浮液接种至菌丝球培养基中摇床培养，得绿色木霉为载体固定化反硝化细菌的混合菌丝球。本发明的方法具有操作简便、培养时间短、可重复使用、沉降性能好的优点，制备的混合菌丝球可显著降低水体中的氮素含量，改善水质状况，使污水达到排放标准，且无亚硝酸盐积累，降低环境污染，对于大规模利用副球菌处理污水具有重要意义。
一种绿色载体进行硝化细菌固定方法

[发明专利]一种丝状真菌固定化酵母的制备方法及其应用-CN202010854799.6在审
发明人：吴晓彤;秦晓瑜;刘丹;刘子正;郭金欣 -专利权人：内蒙古大学
申请日： 2020-08-24 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本申请公开了一种丝状真菌固定化酵母的制备方法及其应用。该丝状真菌固定化酵母的制备方法包括以下步骤：(1)产黄青霉预培养(2)固定化酵母培养：将酿酒酵母与产黄青霉孢子在一定条件下培养，产黄青霉菌丝体将酿酒酵母包裹固定；(3)预发酵灭活产黄青霉：产黄青霉菌丝体包裹固定的酿酒酵母进行预发酵，随着酒精度的升高杀死产黄青霉，形成固定化酵母；(4)采用丝状真菌固定化酵母的制备方法制成的固定化酵母应用于酿造红树莓酒，具有品质风味更好的技术效果。
一种丝状真菌固定酵母制备方法及其应用

[发明专利]一种具有清除多种污染物功能的共固定化菌丝球的制备方法及其应用-CN201610825353.4有效
发明人：燕红;国巍;杜霞;李琳 -专利权人：哈尔滨理工大学
申请日： 2016-09-14 - 公布日： 2019-03-26 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：一种具有清除多种污染物功能的共固定化菌丝球的制备方法及其应用，涉及一种共固定化菌丝球的制备方法及其应用。本发明是要解决现有菌丝球的降解功能较为单一，降解效果不佳的问题。方法：一、制备烟曲霉菌孢子悬液和蜡样芽孢杆菌菌悬液；二、取烟曲霉菌孢子悬液和蜡样芽孢杆菌菌悬液，一起接入到菌丝球成球培养基中，摇床培养，即得到复合菌菌丝球。共固定化菌丝球用于降解木质素、纤维素、半纤维素、染料和重金属离子。该复合菌菌丝球不仅能处理造纸废水，还可用于处理染料废水和重金属离子废水，且在碱性和温度较高的体系中，仍具有较好的处理效果。本发明用于废水处理领域。
菌丝球固定化制备降解蜡样芽孢杆菌曲霉菌孢子复合菌菌悬液悬液污染物重金属离子废水废水处理领域应用重金属离子纤维素半纤维素染料废水摇床培养造纸废水培养基木质素染料成球可用取烟

[发明专利]一种磁载体固定化微生物活菌制剂及其制备方法和应用-CN201510201615.5有效
发明人：李明智;梅荣武;韦彦斐;张宇;王慧荣;许青兰;徐佳佳 -专利权人：浙江省环境保护科学设计研究院
申请日： 2015-04-24 - 公布日： 2017-01-11 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种磁载体固定化微生物活菌制剂及其制备方法和应用，磁载体固定化微生物活菌制剂包括磁载体及固定化在磁载体上的生物活菌，所述生物活菌为乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter‑calcoacetcus)CGMCC 6820、产朊假丝酵母(Candida sp.)CGMCC 2.1495和解淀粉芽胞杆菌(Bacillus sp.)CICC 21290。本发明的磁载体固定化微生物活菌制剂应用于活性污泥法或生物膜法污水处理工艺中，进行污泥原位减量，将磁载体固定化微生物活菌制剂添加到污水中进行处理，可以在提高生化系统处理效果下，降低系统污泥产率，实现剩余污泥的源头减量化。经过本发明活菌制剂的强化调理后，出水COD、NH3‑N、TN、TP、SS浓度将比原出水降低10％以上，单位COD产泥量降低30％以上。
一种载体固定微生物制剂及其制备方法应用

[发明专利]一种以花粉为载体的固定化酶及其制备方法-CN201610556371.7在审
发明人：黄凤洪;郑明明;黄娟;向霞 -专利权人：中国农业科学院油料作物研究所
申请日： 2016-07-14 - 公布日： 2016-11-16 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明涉及一种以花粉为载体的固定化酶及其制备方法，该固定化酶由载体与酶以吸附的方式相结合所形成，所述载体为花粉或者改性后的花粉；所述改性的方法为表面修饰或者磁性修饰，或者兼有表面修饰和磁性修饰。本发明以花粉颗粒或者改性花粉颗粒对酶进行吸附固定化，有效提高酶的稳定性与催化活性，同时，花粉形貌规整，表面呈多孔结构且易于修饰，可为酶固定化提供适宜的微环境，避免酶之间的聚集失活和使用过程中的流失；与常规吸附材料相比具有安全性高，天然易得，绿色环保等优点。
一种花粉载体固定及其制备方法

[发明专利]一种基于酿酒酵母孢子的微胶囊固定化酶的制备方法-CN201410199661.1在审
发明人：中西秀树;高晓冬;施李兵;李子杰 -专利权人：江南大学
申请日： 2014-05-12 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于酿酒酵母孢子的微胶囊固定化酶的制备方法，属于微生物和固定化酶技术领域。本发明将酶表达定位在酿酒酵母孢子的壳聚糖层和二酪氨酸层之间的周质间隙，然后分离纯化获得含有固定化酶的孢子。相比游离酶，本发明制备的固定化酶更加稳定，可抵御不同水解酶的侵袭和耐受较高温度，同时可以重复利用多次。
一种基于酿酒酵母孢子微胶囊固定制备方法

[发明专利]一种利用酿酒酵母二酪氨酸层疏松型孢子固定化酶的方法-CN201410199369.X在审
发明人：高晓冬;中西秀树;施李兵;李子杰 -专利权人：江南大学
申请日： 2014-05-12 - 公布日： 2014-08-06 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用酿酒酵母二酪氨酸层疏松型孢子固定化酶的方法，属于微生物和固定化酶技术领域。本发明将带有自身信号肽的α-半乳糖苷酶基因插入到质粒pRS424-TEFpr上，得到重组质粒pRS424-TEF_pr-MEL1，然后转化OSW2基因缺陷型酿酒酵母，通过以醋酸盐为唯一或主要碳源，并辅以缺乏氮源的条件培养重组酵母，最终收集纯化获得固定化酶。该微胶囊固定化酶一方面可以利用二酪氨酸层将酶包裹在孢子的周质间隙上，同时二酪氨酸层变得疏松后便于底物分子与酶分子进行接触，提高了反应效率。这种独特的空间定位提高了对蛋白酶的稳定性、无需蛋白纯化和固定化操作、降低生产成本等。
一种利用酿酒酵母酪氨酸疏松孢子固定方法

[发明专利]一种以酿酒酵母孢子为载体的固定化酶的制备方法-CN201310422568.8有效
发明人：中西秀树;高晓冬;张海妮;李子杰 -专利权人：江南大学
申请日： 2013-09-16 - 公布日： 2013-12-11 - 主分类号： C12N11/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种以酿酒酵母孢子为载体的固定化酶的制备方法及固定化酶，其通过使用一种酿酒酵母缺陷型菌株△dit1，此菌株产生的孢子壁不含最外的二酪氨酸层，暴露在最外面的一层是壳聚糖，将酶直接固定在此缺陷型的孢子上，得到固定化酶。本发明直接通过培养酿酒酵母△dit1菌株获得大量的酿酒酵母的子囊孢子，再加以破壁纯化得到目的产品，就可以做相应的应用，而无需获得像一般固定化酶所需的载体，方法简便，易于操作，节省费用。
一种酿酒酵母孢子载体固定制备方法

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